Iniziare post-fissando il tessuto DRG sezionato dal midollo spinale del topo anestetizzato in formaldeide al 4% per tre ore a temperatura ambiente. Quindi, incubare il tessuto in saccarosio al 30% in PBS a quattro gradi Celsius durante la notte. Successivamente, preparare l'OCT di base aggiungendo il composto OCT e coprendo la superficie superiore del blocco di alluminio.
Congelare il blocco di alluminio coperto a meno 20 gradi Celsius per cinque-10 minuti. Tagliare la parte superiore dell'OCT a uno spessore di 30 micrometri utilizzando il criostato, fino a quando la sua superficie non è piatta come l'OCT di base. Contrassegnare la parte inferiore dell'OCT di base nella posizione 6:00, prima di rimuovere il blocco di alluminio dal criostato.
Per eseguire l'incorporazione OCT dei DRG, asciugare il tessuto DRG posizionandolo su una capsula di Petri asciutta e spostandolo da una posizione all'altra due o tre volte con le pinzette asciutte. Quindi, posizionare il DRG asciutto sulla base OCT in posizione 12:00, utilizzando una pinzetta asciutta. Assicurarsi di mantenere una distanza di almeno cinque millimetri tra il bordo superiore del DRG e il bordo superiore dell'OCT di base, con la parte dorsale in posizione 12:00 e la parte ventrale in posizione 6:00.
Successivamente, aggiungi l'OCT in una forma rotonda o ovale per incorporare l'intero tessuto DRG con il DRG al centro. Congelare il campione OCT e DRG di copertura a meno 20 gradi Celsius per cinque minuti. Una volta fatto, tagliare la parte superiore del coperchio OCT a uno spessore di 30 micrometri fino a quando il DRG non è visibile.
