Per iniziare, pulire il luogo di lavoro e i materiali con una soluzione di rimozione di etanolo e RNasi al 70%. Preparare appena il tampone di lisi, il tampone di diluizione di lisi, 0,1 x tampone di lisi, e lavare il tampone e mantenere i tamponi sul ghiaccio. Centrifughe a secchio oscillante pre-freddo a quattro gradi Celsius.
Centrifugare la sospensione di cellule progenitrici cardiache in una centrifuga a secchio oscillante. Rimuovere delicatamente tutto il surnatante senza toccare il fondo del tubo. Aggiungere 100 microlitri di tampone di lisi 0,1 x refrigerato alla sospensione cellulare e mescolare pipettando 10 volte.
Dopo cinque minuti di incubazione sul ghiaccio, aggiungere un millilitro di tampone di lavaggio refrigerato e mescolare. Dopo aver centrifugato la sospensione, rimuovere il surnatante e ripetere altri due lavaggi con tampone refrigerato. Preparare il tampone dei nuclei diluiti.
Dopo aver risospeso i nuclei nel tampone dei nuclei, posizionare la soluzione madre di nuclei sul ghiaccio. Quando la qualità dei nuclei isolati è stata valutata dalla valutazione della morfologia della membrana nucleare, i nuclei isolati sono apparsi lisci e uniformemente rotondi al microscopio a campo chiaro, indicando un efficace processo di isolamento.
