Inizia prendendo da 500 a 1000 nanogrammi della scarsa libreria di DNA cellulare. Asciugare il DNA con un concentratore di vuoto e risospenderlo in 3,4 microlitri di acqua priva di nucleasi. Dopo aver aggiunto i bloccanti, e mentre sul termociclatore, a 65 gradi Celsius, trasferire la soluzione di ibridazione con l'RNA biotinilato nella libreria bloccata.
Dopo aver chiuso saldamente il coperchio del tubo, incubare nel termociclatore durante la notte a 65 gradi Celsius. Quindi trasferire 50 microlitri di perle di streptavidina T1 per campione in un tubo a basso legame del DNA da 1,5 millilitri e posizionarli su un magnete da 1,5 millilitri. Una volta che tutte le perle sono attaccate al muro, rimuovere il surnatante lasciando le perline dietro.
Ora lavare le perline tre volte con 200 microlitri del tampone legante dal kit di arricchimento target e risospendere le perle in 200 microlitri di tampone legante. Trasferire il campione nelle sfere risospese mentre si è sul termociclatore e incubare per 30 minuti. Dopo aver lavato le perline con 200 microlitri di tampone di lavaggio 1, incubarle per 15 minuti, ruotando a temperatura ambiente.
Quindi lavare le perline tre volte con 200 microlitri di tampone di lavaggio 2 riscaldato a 65 gradi Celsius e incubare in un blocco termico. Infine, dopo aver amplificato la libreria mediante PCR, eseguire una purificazione del DNA utilizzando perline paramagnetiche aggiungendo 270 microlitri di perline di brodo al campione e mescolando per vortexing. Un profilo di elettroforesi automatizzato da una biblioteca, poco prima della cattura, ha fornito 49,7 nanogrammi per microlitro di DNA in un volume di reazione di 20 microlitri.
Tuttavia, 3,06 nanogrammi per microlitro di DNA sono ottenuti da un profilo di elettroforesi automatizzata ad alta sensibilità da una libreria leachic finita.
