Per iniziare la coltura cellulare, preparare il terreno di coltura DMEM e le soluzioni necessarie per la coltura cellulare. Seminare 1 x 10 al 6° HEK293 in una piastra da 60 millimetri o in una piastra da 6 pozzetti per condizione di trattamento più controllo. Il giorno successivo, trattare le cellule con legami incrociati DNA-proteina, o DPC, induttori di scelta.
Per indurre le DPC, la loro ubiquitilazione e SUMOilazione, raccogliere le cellule a 20, 60 e 180 minuti, o due ore in caso di DPC non enzimatiche. Per indurre la PARilazione delle TOP1-DPC, pretrattare le cellule con 10 micromolari poli-ADP-ribosio glicoidrolasi, o PDD00017273 inibitore di PARG, per un'ora prima di co-trattare con 20 camptotecina micromolare per 20, 60 e 180 minuti.
