Per iniziare, iniettare Meloxicam per via sottocutanea nel topo maschio C57 Black 6J di sei-otto settimane 30 minuti prima della procedura per alleviare il dolore. Dopo aver anestetizzato il topo, pizzicare le dita dei piedi e confermare l'assenza del riflesso. Applichi una goccia di 0,5% di proparacaina sulla superficie corneale di uno e una goccia di lacrime artificiali sull'altro occhio.
Successivamente, utilizzando un punzone per biopsia di due millimetri, perforare i dischi di carta da filtro watman. Aggiungi due microlitri di idrossido di sodio normale in una capsula di Petri pulita e posiziona il disco di carta da filtro sulla goccia di idrossido di sodio, lasciandola assorbire per 15 secondi. Usando la pinza, prendi la carta da filtro e applicala all'occhio trattato con proparacaina al centro della cornea per 30 secondi.
Lavare l'occhio sciacquando con 20 millilitri di soluzione fisiologica sterile in una siringa. Pulisci delicatamente la soluzione salina in eccesso dagli occhi e dall'area circostante utilizzando salviette morbide usa e getta. Posizionare il mouse in una gabbia di recupero su un termoforo caldo fino a quando non si deambula.
Il giorno 10, dopo l'ustione, acquisisci immagini OCT del segmento anteriore degli occhi come scansione volumetrica utilizzando la modalità OCT IR con un campo visivo di 30 gradi e un'intensità IR del 100%. La neovascolarizzazione corneale è germogliata dai vasi limbus verso il centro corneale nell'occhio di topo bruciato dagli alcali, ma non nell'occhio sano. Il gruppo di ustioni alcaline ha dimostrato punteggi significativamente elevati di neovascolarizzazione e opacità rispetto al gruppo di controllo.
L'immunocolorazione delle cornee per i vasi sanguigni e linfatici ha mostrato densità significativamente più elevate di vasi sanguigni e vasi linfatici dopo 10 giorni nel gruppo ustionato rispetto al gruppo di controllo. Lo spessore della cornea visualizzato e quantificato utilizzando l'OCT era significativamente più alto nel gruppo ustionato.
