Per iniziare, prendi una piastra a 96 pozzetti contenente elettrodi di connessione a dito interdigitati che coprono un'area di circa quattro millimetri quadrati. Posizionare la piastra sulla stazione del pozzo e fare clic sul pulsante di configurazione. Se i pozzetti sono collegati correttamente, appariranno le letture verdi.
Tutti i pozzi non collegati saranno identificati come rossi. Aggiungere 200 microlitri di terreno a ciascun pozzetto utilizzato, quindi posizionare la piastra nel rilevamento dell'impedenza del substrato della cella elettrica o nella stazione ECIS. Per stabilizzare i pozzetti e prepararli per gli esperimenti, fare clic su Imposta, seguito da Verifica, quindi fare clic su Stabilizza.
Dopo 40 minuti, rimuovere la piastra dalla stazione e rimuovere il materiale da ciascun pozzetto. Seminare le cellule B2B a una densità di 40.000 cellule per millilitro nei pozzetti contenenti le cellule e posizionare la piastra sulla stazione ECIS nell'incubatrice. Quindi, fare clic su controlla per assicurarsi che tutti gli elettrodi vengano letti dai sensori sulla stazione.
Selezionare il tempo a frequenza multipla per misurare ciascun elettrodo a sette frequenze diverse. Fare clic su Start e lasciarlo funzionare per 24 ore in modo che le celle possano formare un monostrato confluente. La lettura di ogni pozzetto viene visualizzata in un colore diverso.
Dopo circa 24 ore, i pozzetti contenenti le celle mostreranno una maggiore resistenza sul monitor indicando l'attacco delle celle agli elettrodi. Premere pausa per interrompere la raccolta dei dati. Ad esempio, per le modifiche ai supporti, l'edizione dei reagenti e così via.
Esporre le nanoparticelle di ZIF8 al pozzetto bianco e ai pozzetti delle celle con un volume di 100 microlitri per pozzetto, posizionare la piastra sulla stazione e fare nuovamente clic su controlla per assicurarsi che i sensori leggano tutti gli elettrodi. Fare clic su Riprendi per riprendere gli esperimenti dopo la pausa scelta. Dopo la raccolta dei dati, fare clic su Fine per salvare i dati come file di foglio di calcolo.
Per ottenere i parametri alfa fare clic sul modello e, nella schermata visualizzata, fare clic su solo supporto, quindi selezionare il pozzo che contiene solo media. Fare clic su Imposta riferimento per la valutazione dei dati e selezionare il riferimento relativo all'esperimento di controllo. Fare clic su Trova per avviare il raccordo di riferimento.
Selezionare Imposta e adatta intervallo T per elaborare i dati relativi al riferimento selezionato. Per valutare l'allegato della cella, selezionare alfa. Infine, al termine dell'analisi da parte del sistema, fate clic su Salva RBA (Save RBA) e salvate i parametri come file di foglio di calcolo.
L'analisi del comportamento cellulare in seguito all'esposizione ai MOF ZIF8 è stata eseguita attraverso il rilevamento dell'impedenza del substrato elettrico della cella. Le immagini hanno mostrato cambiamenti nelle interazioni tra substrato cellulare e i cambiamenti dipendono dal tempo di esposizione e dalla dose utilizzata.
