Per iniziare, fissare il topo in un cono di contenimento di plastica, racchiudere la grande estremità del cono attorno alla base della coda. Assicurarsi che l'animale sia a suo agio e che la respirazione sia illimitata durante tutta la procedura. Immergere la coda in acqua tiepida per circa un minuto per dilatare la vena e asciugare la coda con un tovagliolo di carta.
Nel sistema di immobilizzazione, posizionare l'animale rivolto verso il basso con la coda sdraiata su una piastra elettrica. Per selezionare la vena caudale appropriata per il campionamento, ruotare l'intero animale sul lato destro o sinistro. Utilizzare il terzo terminale della coda per la perforazione dei vasi sanguigni poiché i vasi diventano più superficiali in questa zona.
Pulire la coda con salviette a etanolo al 70% sul sito di foratura e posizionarla sul bordo del termoforo, creando un angolo nel terzo terminale della coda. Questo porta la vena in superficie e crea più spazio per prelevare il campione. Per il prelievo di sangue, spostare lo stantuffo avanti e indietro nella siringa più volte per attenuare il prelievo e quindi tirare lo stantuffo per creare una pressione negativa nella siringa.
Fissare la coda piatta sul termoforo usando l'indice e il medio non dominanti. Posizionare il dito medio prossimalmente e l'indice distalmente con il sito di puntura tra queste due dita. Far scorrere la siringa da insulina contro l'indice con la cruna dell'ago rivolta verso l'alto fino a quando non viene inserita nella vena.
Questo crea un angolo di 35 gradi tra l'ago e la coda. Una volta che l'ago è entrato nella vena, il sangue fluirà nella siringa. Prelevare lentamente lo stantuffo della siringa a una velocità costante per raccogliere il volume desiderato.
Rimuovere la siringa dalla coda e lasciare che si formi una goccia di sangue sul lato della puntura della coda. Aspirare questo sangue per raccogliere qualche microlitro in più di sangue, in caso di una procedura non sterile. Applicare pressione sul sito di puntura per fermare l'emorragia e pulire l'area con una nuova salvietta imbevuta di alcool.
Dopo aver rimosso il topo dal cono, riportarlo nella sua gabbia. Le percentuali di successo con i metodi di puntura della vena della coda sono state confrontate con il tasso di successo del metodo di puntura della vena del pene in anestesia. È interessante notare che, sotto anestesia, la vena della coda è diventata molto inaffidabile e ha avuto un tasso di successo di solo il 25% Le percentuali di successo hanno mostrato risultati quasi simili per la puntura della vena della coda nei ratti coscienti e la puntura della vena del pene in anestesia.
Il prelievo di sangue è stato eseguito in meno di sei minuti nella puntura della vena della coda senza anestesia e il metodo di puntura della vena del pene in anestesia, mentre il metodo di puntura della vena della coda in anestesia ha richiesto più di otto minuti a causa di molteplici fallimenti.
