Inizia raccogliendo semi di soia selvatica, S.Americanum e la varietà locale di zucca. Semina i semi in vermiculite ad una profondità di un centimetro e annaffiali accuratamente. Coltivarli in una camera di crescita a circa il 70% di umidità relativa.
Rimuovere il ceppo K599 di A.rhizogenes dal congelatore a 80 gradi Celsius e attivarlo su un terreno LB solido a 28 gradi Celsius per 48 ore. Quindi selezionare un singolo clone del ceppo K599 e coltivarlo in un millilitro di antibiotico liquido contenente terreno LB per 12 ore. Distribuire uniformemente 500 microlitri della sospensione batterica su un antibiotico solido contenente terreno LB e incubare a 28 gradi Celsius per 24 ore.
Dopo sette giorni, quando i cotiledoni della piantina sono spiegati, utilizzare un bisturi affilato sterilizzato per tagliare circa 0,5-un centimetro dell'ipocotile. Scartare la radice primaria e una porzione dell'ipocotile. Rivestire l'incisione ipocotilicica con batteri K599.
Piantare piantine in vermiculite umida e infettare 30 piante di ogni specie usando la trasformazione delle radici pelose mediata da A.rhizogenes. Quindi innaffiare le piante con cinque millilitri di sospensione batterica K599 risospesa in un quarto di resistenza Gamborg B5 terreno basico. Coprire i vasi con un sacchetto di plastica trasparente e metterli in una camera di crescita.
Coltiva le piante per circa 12 giorni dopo l'inoculazione. In questo momento, nuove radici pelose dovrebbero essere generate nel sito di incisione, raggiungendo in genere lunghezze da due a cinque centimetri. Utilizzando un sistema di imaging a luminescenza CAMI con luce di eccitazione verde a 540 nanometri ed emissione a 600 nanometri, rilevare l'espressione del gene reporter DsRed2.
Vengono visualizzate le radici di piante composite di soia selvatica, S.Americanum e zucca sotto la luce di eccitazione naturale e verde.
