Iniziare somministrando 0,3 milligrammi per millilitro di buprenorfina per via sottocutanea al ratto anestetizzato. Montare il ratto sul telaio stereotassico. Quindi, usa un rasoio per radere la pelliccia dalla testa.
Disinfettare la pelle con tre cicli alternati di iodio povidone al 10% e alcool, utilizzando tamponi di cotone sterili, strofinando in direzioni diverse per tre-cinque secondi ogni volta. Applicare un unguento per gli occhi per prevenire la secchezza. Ora, fai un'incisione di due centimetri lungo la linea mediana della testa usando un bisturi sterile, quindi pulisci meticolosamente il cranio usando tamponi sterili e soluzione fisiologica.
Identificare il bregma utilizzando un ago da siringa Hamilton da 10 microlitri montato sul dispositivo stereotassico e impostarlo su 00. Spostare il dispositivo in coordinate anteriori, posteriori e laterali. Crea un foro di un millimetro usando un trapano dentale.
Caricare quattro microlitri del cocktail di rilascio nella siringa Hamilton da 10 microlitri, quindi abbassare con cautela l'ago con un bordo smussato o conico per entrare in contatto con la dura. Inserire l'ago alla profondità desiderata di 3,5 millimetri. Mettere in infusione due microlitri del cocktail di rilascio alla velocità di un microlitro al minuto.
Lasciare l'ago in posizione per altri due minuti, quindi recuperarlo lentamente per evitare che il cocktail di rilascio emerga. Suturare l'incisione con nylon 5/0 e pulire l'area suturata con antisettico. Quindi trasferire l'animale nell'area di monitoraggio post-operatoria.
L'iniezione di più di tre microlitri del cocktail di rilascio ha portato a lesioni meccaniche non specifiche. L'iniezione di due microlitri del cocktail ha portato alla comparsa di cluster immunopositivi a doppia cortina che erano visibili anche dopo otto mesi. L'immunocolorazione cerebrale ha rivelato siti di denudazione sullo strato ependimale, vicino solo al livello delle iniezioni.
Un graduale declino delle perturbazioni dello strato ependimale è stato osservato in aree più posteriori e più anteriori della zona subependimale.
