Inizia preparando una capsula di Petri di manutenzione temporanea con foglie crocifere asportate e carta da filtro infiltrata d'acqua sul fondo. Quindi posiziona cinque afidi sulla capsula di Petri preparata. Quando gli afidi aumentano di numero, taglia le foglie originariamente asportate in quattro o sei pezzi più piccoli.
Trasferisci ogni piccolo pezzo di foglia con gli afidi in piastre di Petri separate contenenti foglie fresche e carta da filtro bagnata. Per raccogliere il DNA genomico degli afidi, omogeneizzare prima gli afidi usando un pestello a pellet. Successivamente, estrai il DNA utilizzando un kit di isolamento del DNA genomico Gene-Spin secondo le linee guida del produttore.
Termina il processo di estrazione eluindo il DNA genomico con 50 microlitri di acqua preriscaldata priva di nucleasi. Eseguire l'amplificazione PCR e il sequenziamento del DNA aggiungendo il campione di DNA alla miscela master PCR con coppie di primer. Analizzare il prodotto PCR utilizzando l'elettroforesi su gel di agarosio all'1% per confermare l'identità dell'afide della senape.
Gli afidi raccolti sul campo sono stati confermati come afidi della senape utilizzando marcatori molecolari, tra cui la dimensione dell'amplicone della PCR e il sequenziamento della CO1 di Lipaphis erysimi.
