Inizia preparandoti per una craniotomia posizionando un tappetino da banco pulito sul piano di lavoro. Fissare con del nastro adesivo l'ogiva di un vaporizzatore all'isoflurano sulla superficie di lavoro. Quindi, posizionare il tubo silastico all'estremità di un ago calibro 18, assicurandosi che sporga un millimetro della punta dell'ago.
Esercitati con il movimento dell'ago segnando un foglio di carta con un punto di partenza per bregma, un altro 0,2 millimetri lateralmente, e fai un segno finale, un millimetro caudale al secondo segno. Esercitati a spostare l'ago dal punto di partenza al secondo segno, quindi al segno finale, assicurandoti che il movimento sia ripetibile senza guide. Quindi, radere la testa dell'animale anestetizzato.
Posizionare il mouse sul piano di lavoro, mantenendo la testa nell'ogiva nasale per mantenere l'anestesia e applicare il lubrificante per gli occhi su entrambi gli occhi. Ora, strofinare il sito di iniezione con una garza sterile imbevuta di soluzione di iodio. Quindi, pulisci l'area con un tampone imbevuto di alcol.
Ripetendo questo processo tre volte. Tenere saldamente la testa con la mano non dominante, appoggiando il mouse sul piano di lavoro. Trascinare l'ago calibro 18 preparato sulla pelle della testa, lungo la linea mediana in direzione rostrale e caudale per identificare il bregma.
Ora, sposta l'ago di due millimetri lateralmente e di un millimetro caudale fino al sito di iniezione. Tenendo l'ago in verticale, spingerlo con decisione attraverso la pelle e l'osso, fino a quando il tubo non è a filo con la pelle. Ritrarre l'ago, ruotare e premere nuovamente attraverso la pelle e l'osso, ripetendo il processo per creare un piccolo foro nell'osso.
Usando l'ago smussato, verificare la presenza di un foro sufficiente nell'osso, abbastanza grande da consentire il passaggio dell'ago. Rimuovere il mouse dall'ogiva. Procedere alla pulizia del sangue dal sito di iniezione utilizzando una garza sterile.
Metti il topo in una gabbia, su uno scaldagabi, fino a quando non si sveglia.
