Per iniziare, fissare il capillare in vetro borosilicato alle clip imbottite in gomma nell'estrattore verticale manuale per micropipette. Impostare la temperatura di calore dell'estrattore per micropipette a 950 gradi Celsius ed eseguire il pre-pull per ottenere un capillare di vetro più sottile e morbido. Quindi impostare la temperatura del calore a 790 gradi Celsius ed eseguire un pull secondario per produrre le micropipette finali.
Utilizzando un macinino per micropipette, affilare con cura l'apertura del puntale fino a un diametro esterno di 11 micrometri. Quindi posizionare le micropipette in un tampone di serraggio di spugna all'interno di un barattolo di vetro. Incubare le uova di gallina fecondate fino allo stadio di sviluppo 18 in un'incubatrice a dondolo umidificata a 37 gradi Celsius.
Pulire accuratamente l'area di lavoro con etanolo al 70%. Dopo lo sviluppo, rimuovere le uova dall'incubatrice. Spruzzare le uova con etanolo al 70% e lasciarle asciugare all'aria.
Quindi posiziona l'uovo su un portauova con l'estremità più grande rivolta verso l'alto. Usando un paio di pinze dentate affilate, picchiettare con cautela l'estremità più grande del guscio d'uovo per creare un foro di due centimetri di diametro. Quindi rimuovere i frammenti del guscio dell'uovo.
Posizionare l'ovulo su un tavolino da microscopio da dissezione e localizzare l'embrione. Successivamente, usa le pinze e le forbici da dissezione fine per tagliare la membrana amniotica che copre la parte superiore dell'embrione. Quindi posizionare una capsula di Petri da 60 millimetri sopra l'apertura dell'uovo.
