Inizia pulendo delicatamente i gusci delle uova di gallina livornese bianca fecondate con salviette imbevute di etanolo senza lanugine. Incubare le uova fino alla fine smussata fino allo stadio desiderato, di solito da 20 a 21 HH. Prima di iniziare la procedura, preparare il numero richiesto di nodi legando un nodo a rovescio sciolto in una sutura a 10 zeri lunga 1,5 centimetri.
Assicurati che il nodo non sia stretto e sia abbastanza grande da adattarsi agli atri. Apri delicatamente il guscio dell'uovo con l'estremità posteriore delle pinzette, sostenendo saldamente l'uovo per evitare crepe indesiderate. Apri una finestra dall'estremità smussata dell'uovo e rimuovi sia la membrana esterna che quella interna.
Utilizzare le microforbici per rimuovere solo la membrana vitellina necessaria. Una volta che l'embrione è libero dalla membrana vitellina, posizionare la pinzetta a punta chiusa sotto il segmento dorsale dell'embrione e capovolgerla delicatamente per esporre il lato sinistro. Rimuovi tutte le membrane immediatamente intorno alla gemma atriale rimuovendo prima le membrane grossolane e poi usando una pinzetta più fine per rimuovere la membrana fine.
Posizionare il nodo pre-preparato vicino all'embrione. Orientare correttamente il nodo aperto sul bocciolo atriale sinistro per eseguire il serraggio del nodo. Usando delle microforbici, taglia le estremità della sutura in eccesso il più vicino possibile al bocciolo e rimuovi i pezzi di sutura in eccesso con una pinzetta.
Infine, utilizzando una pinzetta chiusa, riportare l'embrione nella sua posizione originale. Dopo aver completato la microchirurgia, coprire l'ovulo con un doppio strato di param e rimetterlo nell'incubatrice. La legatura atriale sinistra, o modelli LAL, ha mostrato che è stata ottenuta una struttura miocardica più compatta con cambiamenti morfologici significativi rispetto allo sviluppo normale.
È stata osservata una deposizione di matrice extracellulare intorno all'interstizio cardiaco, simile alla fibrosi miocardica. Le misurazioni morfometriche della porosità hanno rivelato una cavità ventricolare sinistra più piccola e una compattazione trabecolare nei modelli LAL. A HH 25 del modello LAL, sono stati osservati un allargamento della cavità ventricolare destra, un'architettura trabecolare alterata e un volume miocardico.
L'imaging con tomografia a coerenza ottica dei modelli LAL ha mostrato una significativa riduzione delle dimensioni e del diametro del ventricolo sinistro rispetto al controllo. I gruppi LAL hanno anche mostrato un aumento dello spessore della parete rispetto ai gruppi di controllo a HH 25.
