Trasferire le griglie pulite con il lato della pellicola fenestrato rivolto verso l'alto sulla carta assorbente bagnata. Immergere le griglie idrofobiche verticalmente nell'acqua per evitare che si pieghino a causa della tensione dell'acqua. Disponi le griglie sommerse in una matrice quadrata, tenendole vicine ma non sovrapposte.
Riempire l'abbeveratoio di rivestimento della griglia con altra acqua deionizzata, assicurandosi che la superficie dell'acqua sia almeno cinque millimetri sopra le griglie. Per estrarre la pellicola di grafene MMA dal piatto, abbassare lentamente il vetrino di copertura nel piatto ad angolo, a una certa distanza dal film di grafene. Posizionare il vetrino coprioggetto sotto il foglio di grafene MMA e allinearne i bordi parallelamente al foglio.
Quindi, solleva il vetrino coprioggetto verticalmente dall'acqua, portando con sé la pellicola di grafene MMA. Trasferire la pellicola di grafene MMA nella vasca abbassando la vetrina coprioggetto nell'acqua con un angolo di 45 gradi in modo che la pellicola si stacchi dalla vetrina, e galleggi sulla superficie dell'acqua. Posizionare la pellicola di grafene MMA sopra le griglie prima che il livello dell'acqua diminuisca.
Utilizzando una pipetta Pasteur la cui punta è stata fusa, manipolare attentamente la posizione del film di grafene MMA. Usando una siringa, abbassa lentamente il livello dell'acqua in modo che il film di grafene MMA atterri perfettamente sulle griglie e ne copra completamente le superfici. Usando un paio di pinzette pulite e asciutte, solleva la carta assorbente che tiene le griglie su una capsula di Petri pulita e priva di polvere.
Posizionare la base del blocco di supporto della griglia TEM di bloccaggio sul fondo del primo piatto di cristallizzazione contenente 200 millilitri di acetone fresco. Trasferisci individualmente ogni griglia con il lato MMA rivolto verso l'alto dalla carta assorbente a un pozzetto nel blocco portagriglia. Coprire il piatto con un foglio di alluminio e agitare delicatamente su uno shaker orbitale per 30 minuti.
Fissare le griglie posizionando il coperchio metallico sul blocco portagriglia. Quindi, usando una forchetta piegata o una pinzetta lunga, solleva con cautela il blocco dal piatto e posizionalo sul fondo del secondo piatto contenente 200 millilitri di acetone fresco. Dopo aver rimosso il coperchio dal blocco, agitarlo delicatamente su uno shaker orbitale per 30 minuti.
Riposizionare il coperchio sul blocco porta griglia e trasferirlo nel piatto contenente 200 millilitri di alcol isopropilico. Rimuovere il coperchio prima di agitare delicatamente per 20 minuti. Trasferire le griglie in una piccola capsula di Petri di vetro ricoperta di carta assorbente e asciugare le griglie all'aria per 10 minuti.
Nei modi di diffrazione TEM, le griglie EM ricoperte da un monostrato di grafene mostrano picchi di Bragg corrispondenti al reticolo esagonale del grafene. Le griglie di grafene hanno un effetto concentrante su un campione, come osservato quando si confronta l'apoferritina applicata alle griglie d'oro sacro con e senza il supporto del grafene. Una rapida trasformata di Fourier della micrografia crioEM dell'apoferritina su griglie d'oro ricoperte di grafene ha anche mostrato picchi di Bragg corrispondenti al reticolo esagonale del grafene.
