Per iniziare, placcare l'80% di cellule tumorali maligne confluenti della guaina nervosa periferica o cellule MPNST a una densità di 1200 cellule per pozzetto in piastre a 96 pozzetti a parete nera. Dopo aver preparato le diluizioni del farmaco da testare, aggiungere ogni diluizione o veicolo ad almeno tre cellule replicate. Per valutare il numero diretto di cellule, aggiungere alle piastre il farmaco 33342 a una concentrazione finale da uno a cinque microgrammi per millilitro.
E incubare le piastre per 30 minuti a 37 gradi Celsius. Posizionare le piastre su un citometro per imaging ad alta produttività ed eseguire la scansione delle piastre utilizzando l'opzione di conteggio diretto delle cellule per il numero totale di cellule con tempi di esposizione da 100.000 a 600.000 millisecondi. Analizza le letture utilizzando il software, esportale in un foglio di calcolo e utilizza un software appropriato per le analisi statistiche.
