Dopo aver esposto il cuore di un ratto anestetizzato, tagliare l'atrio destro usando delle forbici sottili e iniettare 100 millilitri di liquido perfuso refrigerato a circa due millilitri al secondo entro un minuto. Posiziona il ratto in posizione prona. Tagliare la colonna vertebrale in corrispondenza della spina iliaca antero-superiore e del punto di spostamento della curvatura della colonna toracica.
Posizionare immediatamente la colonna vertebrale isolata nella soluzione di perfusione ghiacciata ossigenata per lavare via il sangue residuo e il tessuto adiposo. Quindi trasferire la colonna vertebrale isolata nel vassoio anatomico con il lato dorsale rivolto verso l'alto e l'estremità rostrale vicino all'operatore. Riempire il vassoio con 50 millilitri di soluzione di taglio ghiacciata continuamente ossigenata.
Sotto un microscopio da dissezione, tagliare i peduncoli vertebrali su entrambi i lati dall'estremità rostrale usando delle microforbici. Successivamente, recide delicatamente la dura madre lungo la linea mediana dorsale con delle microforbici. Sollevare con cautela la parte rostrale del midollo spinale e tagliare la radice nervosa, lasciando circa un millimetro di riserva.
Dopo che il midollo spinale è stato separato dal canale vertebrale, fissarlo con il lato ventrale rivolto verso l'alto utilizzando due spille per insetti. Taglia le radici nervose in eccesso, lasciando intatto circa un millimetro. Quindi separare l'allargamento lombare a una lunghezza di sei o sette millimetri usando una micro forbice.
