Dopo aver posizionato la fibra per microdialisi nell'avambraccio, posizionare la siringa monouso nel vassoio portasiringhe sulle pompe per microinfusione. Durante la fase di iperemia, perfondere le fiole lattate, la soluzione salina o la soluzione veicolare. Fissare l'unità di riscaldamento locale alla pelle, assicurandosi che copra la membrana semipermeabile, utilizzando il disco adesivo della sonda.
Inserire la sonda di flusso laser doppler nell'apertura al centro del riscaldatore locale e iniziare a registrare i valori di flusso dei globuli rossi o dei globuli rossi facendo clic su Avvia sul software di acquisizione dati. Posizionare un bracciale automatico per la pressione sanguigna sul braccio di un soggetto non strumentato. Impostare i riscaldatori locali a 33 gradi Celsius per mantenere una temperatura della pelle termoneutra.
Per aggiungere un commento alla registrazione continua nel software di acquisizione dati, fare clic sulla casella di testo nell'angolo in alto a destra dello schermo. Digitare un commento, selezionare il canale che deve ricevere il commento e fare clic su Aggiungi. Avviare la raccolta dei dati di base una volta che il flusso di globuli rossi si stabilizza a 33 gradi Celsius di calore locale inserendo il commento, avviare la linea di base.
Misurare e registrare la pressione arteriosa basale dopo 5-10 minuti di raccolta dei dati basali. Immettere il commento, la linea di base finale nel software di acquisizione dati. Spegnere le pompe per microinfusione e sostituire le siringhe della soluzione ringer lattata con la siringa contenente la concentrazione più bassa di acetilcolina.
Dopo aver fissato le nuove siringhe e aver confermato la perfusione del fluido attraverso la sonda, riaccendere le pompe per microinfusione. Immettere start meno 10 come commento nella registrazione del software di acquisizione dati. Durante l'ultimo minuto di perfusione, misurare e registrare la pressione sanguigna.
Una volta terminata la perfusione per una data concentrazione, sostituire la siringa con la successiva concentrazione più alta. Dopo la perfusione finale, aumentare la temperatura del riscaldatore locale a 43 gradi Celsius. Lasciare che il flusso dei globuli rossi si stabilizzi e sostituire la soluzione ringers con nitroprussiato di sodio.
Misurare e registrare la pressione sanguigna ogni tre minuti circa durante questa fase di vasodilatazione massimale. Una volta che si è verificato un plateau di flusso massimo di globuli rossi, selezionare Stop nell'angolo in basso a destra del software di acquisizione dati. Registrare la raccolta dei dati di base come illustrato in precedenza.
In base ai requisiti del protocollo, aumentare i riscaldatori locali a 39 o 42 gradi Celsius. Dopo che il flusso dei globuli rossi si è stabilizzato in risposta all'applicazione di calore locale, perfondere L-Name attraverso la sonda di microdialisi. Quindi, imposta i riscaldatori locali a 43 gradi Celsius.
Quindi iniziare la profusione di sonde di microdialisi con nitroprussiato di sodio dopo che il flusso di globuli rossi si è stabilizzato a 43 gradi Celsius, consentendo al flusso di raggiungere il suo plateau massimo. Una volta iniziata la profusione per ciascuna dose, è stato osservato un aumento continuo del flusso di globuli rossi fino a raggiungere un picco, seguito da un plateau indotto dal calore e dagli SNP. La profusione di nitroprussiato di sodio ha prodotto la massima vasodilatazione locale, descritta come un aumento del flusso di globuli rossi.
Un flusso di globuli rossi relativamente più basso è stato osservato in presenza di un inibitore dell'ossido nitrico sintasi. Durante la vasodilatazione locale massima, ci sarà un aumento esponenziale del flusso di globuli rossi, a causa della precedente inibizione dell'ossido nitrico sintasi. Nel protocollo di riscaldamento locale, L-Name è stato perfuso dopo aver raggiunto un plateau stabile nel flusso di globuli rossi.
È stato osservato un rapido declino del flusso di globuli rossi fino a quando non ha raggiunto un nuovo plateau in risposta a L-Name. Il riscaldamento ha prodotto un'ulteriore risposta di picco e nadir nel flusso di globuli rossi.
