Per iniziare, mescola il colorante alimentare in pasta gel morbida blu con acqua distillata. Cuocere nel microonde le fiale contenenti farina di mais standard fino a quando il cibo non si è sciolto in un liquido. Aggiungere la miscela di colorante a ciascun flaconcino di cibo e mescolare bene fino a quando il cibo non è omogeneo blu.
Aggiungere una quantità di miscela di colorante blu per saturare il colore del cibo, assicurandosi che non ci siano variazioni di colore tra le fiale. Posizionare un tovagliolo di carta sottile sulle aperture del flaconcino durante l'asciugatura per evitare che eventuali mosche vaganti si fermino nel flaconcino. Una volta che il cibo si è raffreddato e solidificato, trasferire le mosche nel flaconcino blu contenente cibo.
Incubare le fiale con le mosche per una notte a 25 gradi Celsius. Il giorno successivo, trasferisci le mosche in fiale contenenti cibo standard per Drosophila e numera ogni fiala. Incubare le mosche a 25 gradi Celsius per 60 minuti.
Dopo l'incubazione, trasferire le mosche in nuove fiale con mangime standard per Drosophila. Tracciare una linea tratteggiata lungo la lunghezza del flaconcino per segnare il punto di partenza per il conteggio. Contare manualmente i punti piccoli, rotondi, opachi e incolori sulla parete di ogni flaconcino.
Registrare il rapporto tra i punti blu e il numero totale di punti per ogni flaconcino. Nei moscerini di controllo, il cibo blu viene espulso in tempi relativamente brevi, mentre nei moscerini alfa-sinucleina, il cibo blu rimane nell'intestino fino a otto ore. Al giorno 10 post-eclosion, quando i moscerini alfa-sinucleina mostrano un robusto fenotipo neurodegenerativo, sono state osservate differenze significative nel tempo di transito intestinale rispetto ai moscerini di controllo.
Tuttavia, non sono state osservate differenze nel transito intestinale tra i moscerini di controllo e alfa-sinucleina il primo giorno post-eclosione.