Midline Laparotomy Surgery in Donor Mice for Orthotopic Liver Transplantation

Per iniziare, posizionare il topo donatore anestetizzato sotto il microscopio ad alta potenza. Usando un paio di forbici, eseguire una laparotomia della linea mediana dal processo xifoideo alla sintesi pubica. Quindi fai un'incisione trasversale sotto le costole per creare un motivo a croce.

Dopo aver ritirato il processo xifoideo, eviscerare l'intestino e posizionarlo sulla spugna di garza bagnata sul lato sinistro della cavità addominale. Per mobilizzare il fegato, separarlo da tutti i suoi attacchi legamentosi. Una volta che l'arteria epatica corretta o PHA è esposta, utilizzando una pinza curva, scheletrizzarla.

Dopo aver legato il PHA, sezionare l'intera lunghezza del dotto biliare comune, o CBD. Inserire lo stent del dotto biliare nel CBD e fissarlo con una sutura di nylon 10-O, quindi legare l'aspetto distale del CBD. Utilizzando una spugna di garza bagnata, ritrarre il lobo epatico destro verso lo xifoide ed esporre la vena cavo inferiore, o IVC.

Mobilizzare la vena cava infraepatica inferiore, o IHIVC, lontano dal retroperitoneo e cauterizzare la vena surrenale destra. Una volta sezionata e legata l'arteria renale destra e la vena, tagliare entrambi e i restanti attacchi legamentosi. Dopo aver rimosso il rene destro, iniettare 0,5 millilitri di soluzione fredda di istidina triptofano chetoglutarato con 100 unità di eparina attraverso la vena porta, o PV. Dopo un minuto di iniezione, tagliare la vena porta superiormente alla milza e alle vene mesenteriche superiori.

Per perfondere il fegato, iniettare lentamente una soluzione fredda di conservazione del chetoglutarato di istidina triptofano nell'IHIVC fino a quando il fluido proveniente dal PV non è limpido. Posizionare una micro pinza o una sutura fine sull'IHIVC appena sopra la vena renale destra e tagliare appena inferiormente alla pinza. Una volta che il CBD è stato tagliato distalmente allo stent, identificare e legare il dotto cistico con una sutura di nylon 10-O.

Con una pinza, afferrare la cupola della cistifellea e, usando le forbici a molla, tagliare il dotto cistico sopra la sutura per completare la colecistectomia. Ritrarre il fegato inferiormente per esporre la vena cava inferiore sopraepatica, o SHIVC, e tagliarla, conservando una lunghezza adeguata per l'anastomosi nei topi riceventi. Dopo aver rimosso gli attacchi legamentosi aggiuntivi.

Mettere il fegato in soluzione salina fredda.