Per iniziare, utilizzare una pipetta Pasteur di plastica per trasferire delicatamente le fette di cervello macchiate in fluorescenza su piastre confocali con fondo di vetro. Riempi questi piatti con ACSF equilibrato. Con una rete di ferro, fissa le fette di cervello di ratto in posizione.
Quindi, posizionare le piastre confocali con fondo di vetro sul tavolino di un microscopio confocale. Posizionare la fetta di cervello acuto sul fondo del piatto e perfondere con l'ACSF equilibrante durante l'imaging. Utilizzando l'obiettivo 40X, è possibile visualizzare le cellule della parete della microvascolarizzazione corticale cerebrale.
Successivamente, utilizza un software compatibile per acquisire pile di immagini. Identifica la microvascolarizzazione cerebrale e i periciti in base alla loro rete e morfologia, quindi individua una regione specifica contenente una rete di microvascolarizzazione cerebrale su ciascuna fetta di cervello e acquisisci immagini. In condizioni fisiologiche normali, i periciti cerebrali non subiscono la morte cellulare.
Sono stati rilevati periciti vitali che non sono stati colorati con ioduro di propidio. I modelli SAH hanno mostrato periciti vitali all'interno della microvascolarizzazione. Sono stati rilevati anche periciti non vitali.
I periciti non vitali marcati con ioduro di propidio "sono rimasti distaccati dall'intera microvascolarizzazione.
