Per iniziare, preparare le soluzioni per la cellula, la siringa e per la pulizia. Aggiungere campioni di proteine o tamponi a tre pozzetti consecutivi su una piastra da 96 pozzetti. Ora aggiungi il 100% di DMSO di conseguenza in modo che la concentrazione finale sia del 2%Esegui tutte e quattro le titolazioni sul microcalorimetro.
Ogni titolazione deve consistere in un'iniezione iniziale di 0,4 microlitri di proteina a due microlitri al secondo, seguita da 19 iniezioni di soluzione siringa da 2 microlitri alla velocità di 2 microlitri al secondo a intervalli di 120 secondi per un totale di 20 iniezioni. Eseguire tutti gli esperimenti a 25 gradi Celsius agitando a 600 giri/min. Per l'analisi dei dati, adattare i dati a un singolo modello di sito di legame per ottenere la stechiometria n, la costante di dissociazione e l'entalpia di legame.
È stata eseguita la caratterizzazione del complesso binario VHL MZ1 e del complesso VHL MZ1 Brd4. È stata osservata una cooperazione positiva.
