Bang-Sensitive Assay for the Study of Seizure-Like Behavior in Drosophila

Per iniziare, raccogli le mosche vergini della linea ibrida tub-Gal4 e le mosche maschi della linea UAS-cac-RNAi. Trasferisci le mosche vergini e maschili nella stessa fiala per raccogliere la prole. Dopo tre-cinque giorni di occlusione, utilizzare un pennello per raccogliere la prole e le mosche UAS-cac-RNA tub-GL4.

Un giorno prima del test, trasferire le mosche in nuove fiale pulite con il cibo. Successivamente, posizionare con cura da quattro a sei mosche anestetizzate con anidride carbonica in singole fiale fresche. Posiziona una fotocamera su un treppiede davanti a una lavagna.

Regolare manualmente la messa a fuoco della fotocamera con una fiala vuota. Ora, fai vorticare le fiale con le mosche all'impostazione più alta per 10 secondi. Posizionare immediatamente il flaconcino sulla lavagna e osservare le mosche per eventuali comportamenti simili a convulsioni.

Misura il tempo di recupero come il tempo necessario alle mosche per riacquistare la capacità di stare in piedi. Le mosche knockdown cac hanno mostrato tassi significativamente più elevati di comportamento simile a convulsioni rispetto alle mosche selvatiche. La percentuale di recupero delle mosche da abbattere entro un secondo è stata significativamente inferiore rispetto alle mosche wild type.