Per iniziare, registra il peso di ogni topo, quindi posiziona il topo soppresso in posizione supina e fissa i suoi arti con del nastro adesivo. Utilizzare alcol isopropilico al 70% per sterilizzare l'area chirurgica. Successivamente, crea un'incisione sulla linea mediana sulla pelle partendo dal medio addome fino alla regione cervicale anteriore.
Per accedere alla trachea, ritrarre con cautela i cuscinetti adiposi, muovere lateralmente i muscoli della cinghia e separare la trachea dal tessuto connettivo circostante. Usando le pinze, crea uno spazio tra la trachea e l'esofago. Quindi sollevare lo xifoide e tagliare il diaframma.
Inserire un emostatico per sollevare lo sterno per un percorso senza ostacoli dallo sterno alla regione del collo. Blocca la gabbia toracica su entrambi i lati e taglia lo sterno estendendosi attraverso i muscoli del collo. Ora rimuovi il timo e qualsiasi grasso o muscolo che ostruisce la trachea per esporre la biforcazione tracheale.
Tagliare i bronchi principali e separare con cura le vie aeree dall'esofago. Successivamente, taglia la laringe e rimuovila. Spruzzare la trachea sezionata con una soluzione salina sterile o una soluzione di conservazione.
Utilizzare una garza sterile imbevuta di soluzione salina sterile o di soluzione di conservazione e posizionarla su ghiaccio per mantenere la vitalità. Dopo aver anestetizzato leggermente il topo e una camera di induzione, iniettare per via intraperitoneale un cocktail composto da xilazina e ketamina. Riportare il topo nella camera di induzione con il 2-3% di isoflurano mantenuto.
Quindi radere il pelo nel sito chirurgico. Confermare l'assenza di risposta riflessa a un pizzicamento del dito prima dell'intubazione orotracheale. Utilizzando un catetere endovenoso calibro 20, intubare il topo per via orotracheale e collegarlo a un ventilatore con il 50% di ossigeno e il 2% di isoflurano.
Ora, attiva un termoforo e posiziona il mouse in una posizione laterale destra sul tappetino con la testa lontana dal chirurgo e la coda rivolta verso il chirurgo. Quindi fissare gli arti con del nastro adesivo. Applicare un unguento veterinario sugli occhi per prevenire la secchezza durante l'anestesia.
Strofinare prima l'area chirurgica con iodio povidone al 7,5%, poi con alcol isopropilico al 70% e infine con iodio povidone al 10%. Durante questo periodo, caricare la trachea del donatore in un catetere endovenoso calibro 16. Dopo aver praticato un'incisione nella pelle del ricevente, cauterizzare il muscolo e il tessuto connettivo.
Utilizzando due divaricatori, aprire il quinto o sesto spazio intercostale e tenere aperta la gabbia toracica. Quindi utilizzare tamponi di cotone e forbici per sezionare il legamento polmonare inferiore. Simulare la creazione del percorso per la trachea del donatore.
Per fissare il tubo di deflusso del ventilatore, occluderlo parzialmente con un rubinetto a tre vie per facilitare il gonfiaggio del polmone sinistro. Perforare il polmone sinistro con un ago calibro 20 per creare un percorso. Quindi inserire il catetere endovenoso calibro 16 nel polmone sinistro ed estrudere la trachea del donatore al suo interno.
Dopo l'inserimento dell'alloinnesto tracheale, rilasciare il rubinetto a tre vie per consentire un flusso espiratorio senza ostacoli attraverso il tubo di deflusso. Per chiudere il sito di iniezione pleurica, posizionare la clip con precisione sul sito della puntura con il bordo allineato al contorno del bordo del polmone. Quindi riempire la cavità toracica con soluzione salina e assorbire la soluzione salina con una garza.
Rigonfiare il polmone sinistro e chiudere le costole con una sutura corrente. Chiudere il muscolo e la pelle con punti di sutura interrotti. Ora, disattiva l'isoflurano e somministra meloxicam analgesico per via sottocutanea alla fine dell'intervento.
Osservare il mouse ricevente finché non è attivo. Quindi rimuovere il tubo tracheale e mettere il topo ricevente in una gabbia. Un allotrapianto tracheale ha mostrato un'ostruzione completa con tessuto fibroblastico e le cellule epiteliali sono state visibilmente distrutte.
Al contrario, un isotrapianto tracheale è rimasto pervio e le cellule epiteliali sono state conservate. Aggregati linfoidi sono stati osservati nel polmone con l'alloinnesto tracheale trapiantato.
