Inizia mettendo il topo in posizione supina e fissando gli arti con gli aghi. Applicare etanolo al 75% sulla parte anteriore del corpo dell'animale. Fai una sezione longitudinale attraverso la pelle e la fascia sull'addome e sul torace.
Taglia le costole parasternali e piega il torace verso l'alto per ottenere il libero accesso al cuore. Fissare il torace piegato verso l'alto con gli aghi. Apri l'atrio destro usando le forbici.
Usando una cannula, applicare 20 millilitri di PBS una tantum nel ventricolo sinistro per eliminare il sangue attraverso l'atrio destro inciso. Fai una sezione longitudinale tagliando la pelle sopra la testa del topo per esporre il cranio e sposta la pelle intorno alla testa usando una pinza. Incidi il cranio con l'aiuto di una forbice lungo la sutura sagittale.
Inserisci la punta delle forbici lungo la linea di incisione per aprire la calotta. Rimuovere le parti rimanenti della calotta con una pinza in modo che il cervello sia completamente esposto. Rimuovi il cervello con cura e posizionalo in una matrice cerebrale murina.
Tagliate il cervello a fette sagittali spesse un millimetro usando una lametta da barba. Con l'aiuto delle forbici, taglia la colonna vertebrale appena sopra la cresta iliaca. Inserire un ago calibro 20 collegato a una siringa da 20 millilitri contenente PBS una tantum nel canale spinale.
Sciacquare il midollo spinale dal canale spinale dalla caudale al cranio. Tagliare il midollo spinale in segmenti lunghi 0,5 centimetri usando un bisturi. Conservare la sospensione cellulare del SNC costituita dal cervello e dal corrispondente midollo spinale in una capsula di Petri contenente tre millilitri di DPBS freddo.
