Per iniziare, posizionare il mouse su un vassoio di dissezione dotato di un cono nasale per la somministrazione dell'anestesia. Verificare i riflessi dell'animale, come la retrazione della zampa, per confermare che l'anestesia abbia raggiunto una profondità adeguata. Quindi, posiziona il mouse in modo da esporre la pelle dorsale.
Inumidire la pelle con abbondante etanolo al 70% per prevenire il distacco dei capelli. Praticare un'incisione lungo la schiena, partendo dalla parte inferiore del torace ed estenderla fino al collo. Usando una pinza a punta piegata, sollevare delicatamente il tessuto adiposo bruno interscapolare e tagliare con cura il tessuto attaccato.
Sollevare il cuscinetto adiposo verso la testa e continuare a tagliare i tessuti attaccati per aprire con cura la regione fino a quando la vena del Sulzer non è esposta. Ora, taglia con cura la vena del Sulzer. Utilizzando un puntale per pipetta da 200 microlitri tagliato dal basso e una pipetta P100, raccogliere circa 40 microlitri di sangue e conservare il sangue raccolto in una provetta per la raccolta del sangue.
Tenere la provetta su ghiaccio fino al processo di raccolta del siero. Inumidire generosamente la pelle ventrale con etanolo al 70% per prevenire il distacco dei capelli. Usando le forbici, apri con cautela la cavità toracica per esporre il cuore.
Utilizzando una siringa da un millilitro dotata di un ago da mezzo pollice calibro 29, perforare con precisione l'area apicale del ventricolo sinistro. Inserire due terzi dell'ago a circa tre-cinque millimetri all'orizzontale destra dell'apice del cuore e tirare indietro la siringa per raccogliere il sangue dal ventricolo sinistro. Quindi, centrifugare i campioni di sangue a 10.000 G per 10 minuti a quattro gradi Celsius.
Utilizzando una pipetta, raccogliere il surnatante e procedere con l'estrazione e l'analisi del metabolita.
