Per iniziare, prendi gli estratti acquosi ed etanolo ottenuti dalla Gracilaria gracilis essiccata. In una micropiastra a 96 pozzetti, erogare due microlitri di ciascun campione e 198 microlitri di DPPH disciolti in etanolo assoluto. Quindi, utilizzando uno spettrofotometro per micropiastre, misurare l'assorbanza a 517 nanometri.
Prendi i cheratinociti umani cresciuti in piastre a 96 pozzetti durante la notte. Aggiungere due microlitri di estratti disciolti di DMSO a 198 microlitri di terreno in pozzetti per micropiastre. Rimuovere il terreno di coltura.
Aggiungere 100 microlitri di MTT alle cellule e incubare al buio per 30 minuti. Per solubilizzare i cristalli intracellulari di formazano, aggiungere 100 microlitri di DMSO. Utilizzando un lettore di micropiastre, misurare l'assorbanza a 570 nanometri.
Il test DPPH ha dimostrato che la temperatura di 40 gradi Celsius ha mostrato valori di inibizione dell'attività ossidante più elevati rispetto agli estratti ottenuti a temperatura ambiente o 70 gradi Celsius. Non sono stati osservati effetti citotossici sui cheratinociti umani, suggerendo che alla massima concentrazione del saggio, sia gli estratti acquosi che quelli di etanolo sono sicuri per l'uso cutaneo.
