Per iniziare, rimuovere dall'incubatore la piastra di coltura Transwell contenente il monostrato enteroide ileale bovino 2D. Lasciare che la piastra si equilibri a temperatura ambiente nell'armadio di biosicurezza per alcuni minuti. Assicurarsi che gli elettrodi STX2 siano stati precondizionati e che il volt ohmmetro sia calibrato a 1000 ohm, secondo le istruzioni del produttore.
Inserire l'estremità più lunga della sonda nel compartimento basolaterale e l'estremità più corta nel compartimento apicale della coltura cellulare epiteliale Transwell. Con la configurazione stabilizzata, effettuare tre misurazioni della resistenza elettrica transepiteliale per ogni inserto Transwell, incluso l'inserto privo di cellule. Calcola la media delle misurazioni per ogni rispettivo inserto.
Sottrarre la misura media dei pozzetti vuoti da quella sperimentale, quindi moltiplicarla per l'area superficiale dell'inserto per determinare la resistenza della barriera epiteliale. I monostrati 2D confluenti sono stati osservati in meno di una settimana di coltura. Le misurazioni di TEER hanno mostrato un aumento costante dei valori nell'arco di sette giorni prima di diminuire il giorno 12.
La microscopia confocale del monostrato 2D colorato dimostra la localizzazione della colorazione nucleare DAPI, della E-caderina e della colorazione F-actina. Le cellule sembrano essere differenziate con cellule enteroendocrine, cellule di paneth e linee cellulari di enterociti. La stimolazione apicale del monostrato ha portato ad un aumento della produzione di citochine.
