Per iniziare, aprire il software compatibile con lo strumento del telaio di carico e selezionare un file di controllo esistente per l'analisi. Accendere l'attuatore. Nel menu di calibrazione, strappare la lettura della forza della cella di carico e impostare lo spostamento dell'attuatore a zero.
Dopo essersi assicurati che il mouse sia completamente anestetizzato pizzicando la punta o la coda, posizionarlo in posizione prona sulla piattaforma. Posizionare la gamba inferiore verticalmente tra due dispositivi di carico. Inserire il piede nell'apertura dell'apparecchio superiore e il ginocchio nella coppa dell'apparecchio inferiore.
Regolare manualmente l'altezza del dispositivo inferiore per applicare un precarico di uno o due Newton e serrare la vite di fermo per tenere il mouse in posizione. Successivamente, applicare un singolo carico di compressione a una forza target compresa tra 12 e 15 Newton. Impostare la velocità di carico nel file di controllo e confermare utilizzando i dati di spostamento della forza.
Se viene applicata una velocità di carico più lenta, interrompere il carico di compressione immediatamente dopo la lesione per evitare danni ad altri tessuti articolari. Preparare una siringa da insulina calibro 29 per iniettare la soluzione della sonda attivabile a fluorescenza. Posiziona il topo anestetizzato su un fianco con il muso in un cono nasale.
Con la mano che non inietta, ritrarre delicatamente la pelle intorno all'occhio per stabilizzare la testa e sporgere l'occhio. Usando la mano che inietta, inclinare lo smusso della siringa verso l'occhio. Inclinare la siringa parallelamente al corpo del topo e procedere facendo avanzare con cautela la siringa oltre l'occhio fino a incontrare una resistenza rigida.
Iniettare lentamente la soluzione della sonda nel seno retro-orbitale ed estrarre l'ago dall'orbita oculare. Infine, applicare l'unguento sull'occhio iniettato.
