Per iniziare, metti 200 drosofila adulte appena nate in una gabbia di plastica a forma di cilindro. Sigillare un lato della gabbia con una rete metallica porosa per la ventilazione e l'altro con una piastra di agar di succo di frutta e pasta di lievito. Il giorno dell'iniezione, sostituire la piastra di agar della gabbia con una piastra di succo di frutta contenente una quantità minima di pasta di lievito.
Incubare la piastra a 25 gradi Celsius per un'ora per raccogliere gli embrioni. Quindi rimuovere la piastra dalla gabbia per fermare la deposizione delle uova e incubare a 25 gradi Celsius per altre due ore per ottenere embrioni di due o tre ore. Per rimuovere il guscio d'uovo dagli embrioni, introdurre due millilitri di soluzione di candeggina al 50% nel piatto del succo di frutta.
Usando un pennello, rimuovi delicatamente gli embrioni dalla piastra e incuba la piastra per due minuti ruotandola ogni 30 secondi per migliorare l'efficienza della rimozione del guscio d'uovo. Quindi versare la miscela di embrioni e candeggina in un colino cellulare di nylon da 70 micrometri. Sciacquare accuratamente gli embrioni con una bottiglia d'acqua per eliminare eventuali residui di candeggina e pasta di lievito.
Usando una lametta pulita, taglia un blocco rettangolare di agarosio e posiziona il blocco su un vetrino. Con un pennello, trasferire gli embrioni dal colino al blocco di gel e distribuirli uniformemente lungo la linea centrale del blocco spazzolando delicatamente. Ora, prepara una pinzetta con le due gambe saldamente fissate insieme per formare un'unica punta affilata.
Sotto un microscopio da dissezione, prelevare i singoli embrioni usando la pinzetta e allinearli lungo il bordo esteso del blocco di gel. Pipettare 10 microlitri di colla eptanica nel punto centrale di un vetrino coprioggetto di 24 x 50 millimetri. Utilizzare il puntale di una pipetta per stendere la colla in un'area rettangolare di 0,5 x tre centimetri.
Usando una pinzetta a punta piatta, solleva il vetrino coprioggetto ricoperto di colla e tienilo saldamente sopra gli embrioni, assicurandoti che il lato della colla sia rivolto verso gli embrioni a circa 45 gradi. Premere delicatamente il vetrino coprioggetto contro il blocco di gel, consentendo agli embrioni di toccare la colla. Rilasciare rapidamente la pressione ed elevare il vetrino coprioggetto.
Quindi erogare 10 microlitri di acqua al centro di un vetrino fresco. Posizionare il vetrino di copertura del cuscinetto dell'embrione su di esso, assicurandosi che il lato dell'embrione sia rivolto verso l'alto. Successivamente, applicare 40 microlitri di olio di carbone halo a un'estremità della striscia embrionale.
Inclinare il vetrino fino a quando l'olio di carbonio dell'alone non copre la superficie dell'embrione.
