Per iniziare, posizionare l'animale anestetizzato e intubato sulla schiena e coprirlo con asciugamani sterili. Utilizzare l'elettrocauterizzazione monopolare per eseguire un'incisione di 20 centimetri, che si estende dalla tacca sternale prossimalmente fino al processo xifoideo distalmente, e per incidere strati di muscoli, grasso sottocutaneo e tessuto connettivo fino allo sterno. Eseguire quindi una sternotomia media, utilizzando una sega oscillante.
Per una visualizzazione efficiente del mediastino, utilizzare un divaricatore toracico specializzato. Sezionare le aderenze utilizzando l'elettrocauterizzazione monopolare o le forbici Metzenbaum. Quindi esporre LIMA sezionando il muscolo parasternale e il grasso.
Successivamente, iniziare la dissezione del LIMA sollevando il bordo sternale sinistro per garantire una visualizzazione ottimale. Applicare una leggera trazione all'avventizia ed esporre i rami arteriosi e venosi del LIMA. Impiegare la dissezione smussata utilizzando la punta dell'elettrocauterizzazione per separarla con cura dalla parete toracica.
Usa clip emo sui rami e cauterizza il lato della parete toracica di questi rami. Quindi tagliare l'estremità distale del LIMA appena prima del punto di biforcazione e dividere il condotto. Fissare l'estremità distale con una sutura di seta 2-O legata liberamente.
Dopo aver preparato l'estremità prossimale per l'innesto, valutare manualmente la qualità del flusso lasciando sanguinare brevemente l'innesto. Ora clamp l'estremità distale del condotto LIMA con una pinza bulldog atraumatica per evitare sanguinamento. Stabilizzare l'arteria discendente anteriore sinistra, o LAD, utilizzando un nastro di retrazione in silicone e uno stabilizzatore tissutale fissato al divaricatore sternale.
Eseguire un'arteriotomia nell'arteria LAD distale alla stenosi, utilizzando una lama 11, ed estenderla con le forbici per iride. Posizionare uno shunt coronarico di dimensioni adeguate nell'arteria LAD. Eseguire l'anastomosi da LIMA a LAD utilizzando una sutura 7-O funzionante e non assorbibile in una tecnica di bypass fuori pompa.
Prendi una sospensione di esosomi di tre millimetri e usa una siringa da cinque millilitri dotata di un ago calibro 18 per mescolarla. Quindi pipettare gradualmente 1,5 millilitri di questa sospensione su due spugne di collagene riassorbibili, poste in una capsula di Petri di medie dimensioni. Per colpire la regione di ibernazione del cuore, posizionare la spugna dell'esosoma capovolta sull'epicardio della regione del setto anteriore nella distribuzione dell'arteria LAD.
Disporre con cura due spugne per coprire completamente la regione di ibernazione. Utilizzare una rete di poliglactina su ciascuna spugna di collagene per garantire una copertura adeguata e cucire la rete sull'epicardio con sottili suture interrotte a 7-O. Eseguire un'incisione separata vicino all'aspetto inferiore dell'incisione sternotomica e posizionare con cura il tubo toracico sull'aspetto anteriore del cuore.
Approssimare lo sterno utilizzando punti di sutura non assorbibili, utilizzando uno schema a forma di otto. Chiudere gli strati di muscolo e pelle utilizzando rispettivamente suture riassorbibili 2-O e 3-O, seguendo la procedura standard. Dopo aver evacuato la cavità toracica con un tubo toracico, sigillare la ferita con una sutura a corda da borsetta.
Una volta chiusa la ferita, rimuovere il tubo toracico. A riposo, il tasso di riempimento di picco sul volume diastolico finale viene confrontato tra quattro gruppi di animali. Nell'infusione di dobutamina a basse dosi, il gruppo con miocardio in letargo ha avuto una diminuzione del tasso di riempimento di picco.
Il gruppo di intervento chirurgico di bypass aortocoronarico ha mostrato un miglioramento, mentre il gruppo di bypass coronarico, più il gruppo di cellule staminali mesenchimali, ha visto un aumento significativo. L'analisi della risonanza magnetica ha rivelato che l'innesto di bypass aortocoronarico, più il gruppo di cellule staminali mesenchimali, non altera la funzione sistolica regionale a riposo. Tuttavia, sotto sforzo, questo gruppo ha mostrato un miglioramento significativo della funzione sistolica regionale rispetto all'innesto di bypass aortocoronarico.
