Per iniziare, tieni fermo il corpo di un topo e allunga la zampa posteriore. Tamponare il sito di iniezione con alcol. Quindi inserire una siringa da un millilitro, dotata di un ago calibro 26 alla base della plica cutanea tra il pollice e l'indice.
Tirare lo stantuffo della siringa per aspirare l'ago. Se necessario, rimuovere e riposizionare l'ago. Iniettare 0,5 millilitri di cloruro di sodio allo 0,9% con o senza bromuro di scopolamina con un unico movimento costante.
Per eseguire il test della secrezione lacrimale, tagliare prima metà di una striscia di carta da filtro lungo la linea centrale. Taglia la testa della striscia per renderla liscia. Posiziona la striscia di carta da filtro sul terzo esterno del sacco congiuntivale della palpebra inferiore del ratto.
Dopo cinque minuti, usa una pinzetta per bloccare la striscia di carta da filtro in una provetta per microcentrifuga. Metti un segno sulla parete del tubo per registrare il volume lacrimale. Per colorare la cornea dell'occhio del ratto, far cadere 0,5 microlitri di soluzione di fluoresceina sodica allo 0,5% nel sacco congiuntivale inferiore di ciascun occhio.
Dopo tre minuti, osservare la cornea sotto la luce blu. Prendi la congiuntiva bulbare dagli occhi di un ratto soppresso. Asportare la cornea dal lato destro di ogni ratto e fissarla immediatamente in paraformaldeide al 4%.
Ritagliare l'epidermide cefalica dal tessuto sottocutaneo lungo la linea che collega l'orecchio e l'angolo esterno dell'occhio. Quindi espandere l'incisione su entrambi i lati e isolare la ghiandola extraorbitaria giallastra. Successivamente, rimuovere completamente il pelo del ratto e separare la ghiandola orbitale extra con una soluzione di cloruro di sodio allo 0,9%.
La secrezione lacrimale del gruppo scopolamina è stata significativamente ridotta. La scopolamina non ha causato alcun difetto epiteliale corneale, come evidenziato dall'assenza di colorazione corneale. L'epitelio corneale dei gruppi scopolamina era relativamente più sottile del gruppo di controllo.
Il gruppo 7.5 ha anche mostrato una connessione intracellulare allentata e una struttura vaculare nello strato basale. I gruppi di controllo avevano epiteli corneali significativamente più spessi. La scopolamina sembrava causare cambiamenti infiammatori nelle ghiandole lacrimali, indicativi di danni funzionali alle ghiandole lacrimali.
Nei gruppi 2,5 e 5 è stata osservata una riduzione della sostanza mucinosa, con infiltrazione di linfociti liberi. Inoltre, il gruppo 7.5 ha mostrato una disposizione irregolare delle cellule con cellule epiteliali di forma irregolare. La scopolamina ha anche causato cambiamenti morfologici nella congiuntiva.
