Per iniziare, raccogliere i reagenti per la preparazione della soluzione di lavoro e metterli a temperatura ambiente. Inoltre, prepara un flacone opaco per conservare la soluzione di lavoro e proteggerla dalla luce. Quindi trasferire 100 microlitri della soluzione di cloruro di ammonio nel flacone opaco del reagente utilizzando una pipetta di trasferimento da 200 microlitri.
Trasferire anche 100 microlitri della soluzione di EDTA di sodio nel flacone del reagente e miscelare mediante pipettaggio. Successivamente, aggiungere 900 microlitri della soluzione di substrato ortotoluidinale nel flacone di reagente opaco e mescolare delicatamente mediante pipettaggio. Quindi trasferire cinque microlitri della soluzione di perossido di idrogeno nel flacone del reagente.
Utilizzando una pipetta di trasferimento da 1000 microlitri, miscelare delicatamente la soluzione mediante pipettaggio. Per preparare i campioni di sperma, accendere il supporto a temperatura costante e riscaldarlo fino a 37 gradi Celsius. Inoltre, tarare la bilancia per il peso del recipiente a base di polimero.
Al ricevimento del campione di sperma, pesare il campione e registrare informazioni dettagliate come il codice di identificazione, l'ora di raccolta, la durata dell'astinenza sulla parete esterna del recipiente a base polimerica. Successivamente, posizionare il campione di sperma sul supporto a temperatura costante per la liquefazione dello sperma. Prelevare il campione di sperma in una pipetta a base polimerica e controllare la liquefazione ogni cinque minuti per 30 minuti fino a quando il campione di sperma non è completamente liquefatto.