In condizioni sterili, utilizzando una pinzetta, trasferire da cinque a 10 linee radicali pelose di Brassica napus su un piatto contenente terreno di rigenerazione. Sigillare il piatto con nastro adesivo permeabile ai gas e coltura a 21 gradi Celsius in un fotoperiodo di lunga durata. Ogni tre o quattro settimane, trasferire le radici pelose in una capsula di Petri con terreno di rigenerazione fresco.
Osservate la formazione callosa dopo circa due settimane e sparate dal calloso dopo altre due settimane di formazione callosa. Individualizzare i germogli e trasferirli nella scatola di coltura vegetale contenente il terreno di allungamento dei germogli. Dopo due o tre settimane, tagliare i resti del callo dal germoglio e trasferire i germogli allungati nella scatola di coltura della pianta contenente il terreno di induzione radicale.
Ora trasferisci la pianta radicata nel terreno e acclimatala prima nei fitotroni Quindi trasferisci la pianta in una serra per la fioritura. Per accelerare la produzione di piante T1, raccogliere silique contenenti semi verdi maturi dai rigeneranti T0. Durante il lavoro in una flow box sterile, sterilizzare in superficie le silique con etanolo al 70%.
Posizionare le silique su un piatto o su un vetrino. Utilizzando un ago calibro 24 montato su una siringa da un millilitro, tagliare le silique lungo i margini della valvola. Aprite i carpali e metteteli da parte.
Raccogli i semi immaturi e trasferiscili in un piatto contenente il terreno di germinazione dei semi. Sigillate la piastra e mettetela in una stanza di coltivazione fino alla germinazione. Rispetto al wild-type, la radice pelosa rigenerativa di B.napus ha mostrato un fenotipo nano con apparati radicali densi, foglie rugose e tempo di fioritura alterato.
