Preparazione di vetrini per l'immunoistochimica ciclica multiplex di sezioni di tessuto tumorale

Per iniziare, ottenere un tumore polmonare primario o un tessuto di metastasi cerebrali per cancro al polmone, incorporare il tessuto tumorale in blocchi di paraffina accoppiati e utilizzando un microtono tagliarlo in sezioni spesse quattro micrometri. Metti le sezioni in acqua. Scegli il migliore usando una pinzetta e incollalo sul vetrino rivestito di polilisina.

Per migliorare l'adesione dei tessuti, incubare il vetrino in forno a 65 gradi Celsius per 30 minuti. Per la disidratazione, immergere il vetrino in xilene, seguito da soluzioni di etanolo di concentrazioni decrescenti, quindi lavarlo con acqua ionizzata per tre minuti. Quindi, immergere il vetrino in una soluzione tampone di citrato di sodio.

Sottoporre il vetrino a fuoco e pressione elevati in una pentola a pressione e lasciarlo raffreddare a temperatura ambiente in acqua distillata per tre minuti. Infine, lavare il vetrino tre volte con PBS per cinque minuti ciascuna.