1 Per iniziare, trasferire il tessuto tumorale2 immerso in 25 millilitri di ibernato A 3 in una capsula di Petri di vetro sterilizzata 4 sotto una cappa a flusso laminare. 5 Usando un microscopio, eliminare con cura 6 tutto il tessuto necrotico. 7 Quindi utilizzare un bisturi 8 e una pinza per tessuti per sezionare i vasi sanguigni.
9 Tagliare il tessuto tumorale in 10 pezzi da uno a due centimetri cubi. 11 Trasferirli in una capsula di Petri di plastica 12 contenente tre millilitri di terreno H-GPSA, 13 e mettere la pirofila sul ghiaccio. 14 Per elaborare manualmente il tumore, trasferire il pezzo di tumore 15 in una capsula di Petri di vetro fresca.
16 Utilizzando due bisturi, sezionare il segmento 17 in sezioni da 0,5 millilitri al microscopio. 18 Per elaborare meccanicamente il tumore, in primo luogo, 19 posizionare correttamente la lama. 20 Quindi regolare lo spessore della fetta da 0,45 a 0,50 millimetri, 21 e fissare la manopola di rilascio del tavolo in modalità di avvio.
22 Tagliare il blocco di agaro in un cilindro lungo due centimetri 23 e incollarlo sul piatto circolare di plastica del tritatutto. 24 Utilizzando un bisturi, creare una fossa nel cilindro dell'agaro 25 e posizionare il tessuto tumorale nella fossa. 26 Quindi posizionare il disco di plastica sul disco di montaggio 27 del tavolo da taglio e premere il pulsante di ripristino 28 per avviare il processo di trinciatura.
29 Dopo il primo giro, ruotare il disco di montaggio di 30 per 90 gradi e ripetere nuovamente 31 per tagliare il tessuto in pezzi rettangolari. 32 Rimuovere il disco di plastica. 33 E poi, utilizzando una spatola per fazzoletti, 34 ruotare solo il tessuto tumorale di 90 gradi.
35 Rimettere il disco di plastica sul tavolo da taglio 36 e premere reset per continuare il taglio. 37 Quindi, utilizzando una pipetta da cinque millilitri, 38 trasferire il materiale lavorato, 39 insieme al terreno, nella capsula di Petri. 40 Mettere immediatamente il piatto sul ghiaccio.
