Iniziare la preparazione dell'acquifase sciogliendo 0,15 grammi di polisorbato 80 in 28,2 millilitri di PBS mescolando a 40 gradi Celsius. Per preparare la formulazione in fase oleosa, sciogliere il trioleato di sorbitano 85 DOTAP e l'acido retinoico nello squalene mescolando a 40 gradi Celsius. Quindi, aggiungere goccia a goccia la fase acquiescente a un millilitro al minuto alla fase oleosa agitando a 1400 giri/min per la preparazione dell'emulsione di olio primario e acqua.
Preemulsionare la miscela utilizzando un emulsionante ad alto taglio a 30.000 giri/min per sei minuti. Trattare l'emulsione primaria di olio e acqua con un omogeneizzatore ad alta pressione per 12 cicli a 900 bar per ottenere una nano emulsione omogenea. Raccogliere l'emulsione in un pallone da 50 millilitri e sterilizzarla con filtro attraverso una siringa con filtro in PES da 0,2 micron.
Collegare il pallone alla linea schlink attraverso il catetere, ruotando il rubinetto a tre vie per collegare il sistema al tubo a vuoto. Accendere la pompa del vuoto per creare il vuoto nel pallone. Quindi ruotare il rubinetto a tre vie per collegare il sistema al tubo di argon e riempirlo di argon.
Rimettere il tappo dei flaconi e sigillarlo con una pellicola di paraffina. Avvolgere il pallone nella carta stagnola e conservarlo a 40 gradi Celsius. Accendere lo strumento di diffusione dinamica della luce e attendere 30 minuti affinché la sorgente di luce laser si stabilizzi.
Diluire la nanoemulsione 50 volte con acqua ultrapura e aggiungere un millilitro di campione alla cella campione corrispondente. Sullo strumento, impostare la temperatura a 25 gradi Celsius. Scegliere l'acqua come mezzo di dispersione e le stoviglie di plastica monouso come cella di misura.
Caricare i campioni e misurare la dimensione delle particelle. Riportare come risultato il valore medio di tre misurazioni ripetute per ciascun campione.
