Preparazione di fette di cervello ex-vivo da tessuto cerebrale di topo per lo studio dei circuiti del bulbo ippocampale-corticale e olfattivo

Per iniziare, configura l'area di lavoro di recupero e manutenzione delle sezioni cerebrali. Prepara l'area di lavoro per la preparazione della fetta cerebrale e imposta il vibratomo. Quindi, imposta l'area di lavoro per l'estrazione e la preparazione del cervello.

Quindi trasferire il cervello di topo estratto in un piatto di coltura di plastica da 90 millimetri con una soluzione di taglio gassata refrigerata nell'area di lavoro di preparazione del cervello. Orientare il cervello per il posizionamento nella muffa dell'agarosio. Applicare la super colla all'estremità rostrale dello stampo in agarosio.

Usa una spatola per posizionare il cervello nello stampo con il lato dorsale rivolto verso il basso per affettare orizzontalmente. Taglia l'ippocampo e i tessuti del bulbo olfattivo. E usando una pipetta Pasteur di vetro, raccogli le fette dopo ogni giro.

Incubare le fette nella camera di recupero artificiale riempita di liquido cerebrospinale in un bagno d'acqua a 32 gradi Celsius per 45 minuti, seguiti da un'ora a temperatura ambiente.