Per iniziare, raccogliere pellet fecali da topi monocolonizzati di Escherichia coli inoculati con fagi T4 in una provetta sterile per microcentrifuga pre-pesata. Registrare il peso finale della provetta e calcolare il peso del campione sottraendo il peso iniziale della provetta. Aggiungere un millilitro di tampone SM sterile alla provetta e vorticare alla massima velocità per omogeneizzare i pellet fecali.
Registrare il volume di tampone SM aggiunto a ciascun campione per i calcoli delle unità formanti colonie o CFU o PFU per grammo. Preparare una serie di otto diluizioni seriali di 20 microlitri di ciascun campione in un tampone SM da 180 microlitri. Individuare cinque microlitri di ciascuna diluizione su una piastra di agar LB contenente E.coli o solo piastre di agar LB per determinare la concentrazione di fagi T4 ed E.coli.
Lasciare asciugare ogni punto prima di capovolgere le piastre e incubare per una notte a 37 gradi Celsius. Il giorno successivo, selezionare la diluizione con da tre a 30 placche numerabili per punto. Contare e registrare il numero di placche e diluizioni utilizzate.
Dividere il numero di placche per il volume placcato in ogni punto per ottenere PFU per microlitro. Moltiplicare questo valore per il fattore di diluizione e il volume di tampone SM aggiunto a ciascun campione per PFU per campione. Infine, dividere per il peso del campione per ottenere PFU per grammo di campione.
I livelli di fago T4 ed E.coli rilevati nei topi, iniettati con due per 10 alla sesta PFU di fago T4 o di un lisato veicolo hanno dimostrato la coesistenza di fago T4 ed E.Coli senza esaurimento di entrambe le popolazioni nell'arco di quattro settimane. Dosi più basse di fago T 4 non hanno influenzato la colonizzazione rispetto a due da 10 alla sesta PFU e non è stato osservato alcun effetto dose-dipendente sui livelli di E.coli.
