Per iniziare, radere delicatamente i peli buccali tra il cuscinetto dei baffi e l'occhio di un topo anestetizzato. Fissa la testa del mouse in una cornice stereotassica o, in altro modo, fissa la testa. Applicare un unguento su entrambi gli occhi per evitare che si secchino.
Strofinare l'area della testa rasata con alcool e poi con Betadine. Sotto un microscopio da dissezione, praticare un'incisione cutanea di quattro millimetri perpendicolare alla linea mediana, approssimativamente a metà strada tra il bordo del cuscinetto dei baffi e l'occhio, appena rostrale al forame infraorbitale e centrata attorno alla linea tra il centro dell'occhio e il centro del cuscinetto dei baffi. Per esporre il nervo infraorbitale, separare senza mezzi termini il tessuto connettivo superficiale, riducendo al minimo i danni alla muscolatura ed evitando le fibre nervose motorie.
Usando un movimento rotatorio, infilare la testa di un ausilio per la legatura uncinato sotto il nervo infraorbitale. Posizionare la legatura dell'intestino cromico attraverso il foro sulla punta dell'ausilio di legatura e ritrarre l'ausilio di legatura in modo che la legatura rimanga sotto il nervo infraorbitale, con entrambe le estremità della legatura equidistanti dal nervo. Fai un nodo scorsoio da entrambe le estremità della legatura e fallo scorrere contro il nervo infraorbitale.
Far scorrere ulteriormente il nodo per restringere il nervo infraorbitale. Quindi posizionare un nodo normale sopra il nodo scorsoio. Tagliare le estremità della legatura, lasciando circa 1,5 millimetri di estremità libere per evitare che il nodo si sciolga.
Chiudere l'incisione cutanea utilizzando suture sintetiche riassorbibili 6-0. Consentire al mouse di recuperare su un pad riscaldato o sotto una lampada riscaldante a infrarossi.
