Per iniziare, posizionare il maialino anestetizzato di quattro-sei giorni in posizione sdraiata dorsale. Dopo aver eseguito l'intubazione orotracheale utilizzando un tubo cuffiato, ausculare le basi polmonari per confermare il corretto posizionamento del tubo endotracheale. Imposta la ventilazione meccanica e monitora continuamente la profondità dell'anestesia durante l'intervento chirurgico attraverso la frequenza cardiaca, la pressione sanguigna e la saturazione di ossigeno.
Regolare i parametri di ventilazione e sedazione secondo necessità. Quindi inserire un catetere da 3 French nell'arteria femorale, seguito da un catetere da 4 French nella vena. Successivamente, avviare il circuito di bypass cardiopolmonare, o CPB, accorciando il tubo CPB mantenendo una distanza sufficiente tra l'animale e la macchina.
Creare un ponte di tubi per collegare il flusso dell'ossigenatore a membrana e l'afflusso della pompa. Una volta sigillati tutti i punti di connessione, spazzare il circuito con 300 microlitri di soluzione salina di eparina e 300 millilitri di sangue fresco di suino donato, seguiti da bicarbonato di sodio, eparina e gluconato di calcio. Una volta che il circuito CPB è pronto, esporre la vena giugulare interna sinistra e inserire il catetere dell'ago al suo interno.
Allo stesso modo, esporre l'arteria carotide destra per prepararsi all'incannulamento. Una volta che è visibile una lampata di sangue, inserire con cautela un filo guida nel vaso. Infilare un dilatatore sul filo e nel recipiente.
Quindi rimuovere il dilatatore. Infilare lentamente una cannula venosa a 8 French a circa quattro centimetri nel vaso e rimuovere il filo, assicurandosi che la cannula rimanga in posizione. Quindi posizionare una cannula arteriosa pediatrica francese 6 nell'arteria carotide destra come precedentemente dimostrato con la dilatazione.
Infine, somministrare un bolo di eparina per via endovenosa attraverso la cannula arteriosa appena posizionata. Dopo aver ottenuto l'accesso, utilizzare suture riassorbibili 3-0 per fissare entrambe le cannule all'animale e nastro adesivo per evitare la rimozione involontaria. Collegare le cannule al circuito CPB, assicurandosi che l'eparina salina venga aggiunta ai punti di connessione per evitare che l'aria entri nel circuito.
Impostare il flusso iniziale da 80 a 85 millilitri per chilogrammo al minuto. Per indurre l'arresto cardiaco, somministrare nove milliequivalenti di cloruro di potassio. Una volta che il cuore si è fermato, isolare l'animale dal circuito.
Quindi mantenere il flusso del circuito CPB per circolare a 1.500 giri/min. Dopo aver raggiunto le condizioni appropriate per l'arresto cardiaco, iniziare la rianimazione cardiopolmonare extracorporea ricollegando il suinetto al circuito CPB. Somministrare tre millilitri di gluconato di calcio e sei millilitri di bicarbonato di sodio attraverso l'accesso arterioso periferico, aggiungendo dosi se necessario.
L'incannulamento dei vasi e la CPB con arresto cardiaco hanno raggiunto un tasso di successo del 92% negli esperimenti. La risonanza magnetica ha dimostrato chiari segni di danno cerebrale precoce nel CPB con animali in arresto cardiaco rispetto al controllo. La modalità di imaging del tensore di diffusione acuta ha identificato meglio i segni di infarto rispetto ad altre sequenze di risonanza magnetica convenzionali.
