Coltivazione idroponica di piantine di Arabidopsis thaliana per inoculazioni batteriche

Per preparare il terreno di coltura per le piantine di Arabidopsis Thaliana, mescolare Murashige a metà forza e terreno Skoog o MS con il 2% di saccarosio e lo 0,9% di agar. Dopo la sterilizzazione, versare il terreno in una capsula di Petri quadrata assicurandosi di evitare l'essiccazione all'aria per mantenere l'umidità. Immergere i semi di Arabidopsis in una provetta da microcentrifuga da due millilitri contenente un millilitro di acqua sterile a quattro gradi Celsius per oltre 12 ore.

Quindi sterilizzare i semi con un millilitro di soluzione di ipoclorito di sodio al 2% per due minuti. Lavare accuratamente i semi sei volte con acqua sterile per rimuovere la soluzione di ipoclorito di sodio. Usando una punta sterile da un millilitro, semina i semi sulla capsula di agar MS.

Sigillare la capsula di Petri con nastro medico traspirante e posizionarla verticalmente in un'incubatrice leggera per una settimana a 28 gradi Celsius con umidità compresa tra il 40 e il 60%Fare dei fori di cinque millimetri su un colino cellulare di 40 micron e sterilizzarlo a 115 gradi Celsius per 30 minuti. Dopo l'estrazione, trapiantare tre piante di A thaliana di sette giorni attraverso i fori di un colino cellulare e metterle in una piastra a sei pozzetti contenente tre millilitri di terreno MS a metà forza con lo 0,5% di saccarosio.