Per iniziare, posizionare un topo anestetizzato e intubato in posizione di decubito laterale destro. Porta entrambe le zampe anteriori nell'angolo in alto a sinistra e le zampe posteriori negli angoli inferiori. Disinfettare il torace sinistro con alcol al 70% prima dell'incisione.
Dopo aver inciso e aperto la pelle sul quarto spazio intercostale, utilizzare una penna cauterica portatile per coagulare i vasi sanguigni visibili all'interno degli strati sottocutanei e muscolari. Con le forbici, dividere i muscoli gran dorsale e dentato anteriore lungo la lunghezza dell'incisione cutanea. Sollevare con cautela la quarta costola con un paio di pinze curve sottili.
Fai un taglio preciso appena sopra la quinta costola per entrare nel quarto spazio intercostale. Quando la pressione negativa della cavità pleurica viene persa e il polmone si ritrae dalla parete toracica, estendere la toracotomia anteriormente e posteriormente nel quarto spazio intercostale. Applicare due divaricatori di costole per aprire lo spazio delle costole, assicurandosi che sia disponibile una finestra di lavoro di almeno un centimetro quadrato per la visualizzazione.
Utilizzare due applicatori a punta di cotone per sollevare la cefalica e mobilizzare il polmone sinistro. Quindi dividere senza mezzi termini il legamento polmonare inferiore traslucido. Riflettere il polmone anteriormente per visualizzare l'ilo polmonare posteriore sinistro.
Quindi taglia circa 10 centimetri di una cravatta di seta 6-0 e posiziona il punto medio della cravatta posteriormente all'ilo. Ora capovolgi il polmone sinistro posteriormente sulla cravatta e tira entrambe le estremità della cravatta anteriormente. Tieni una pinza antizanzare curva nella mano dominante e un paio di pinze nell'altra mano.
Tenere un'estremità libera A della cravatta con la pinza e avvolgere il suo punto medio sul morsetto chiuso una volta. Quindi, afferra il punto medio dell'altra estremità libera B con il morsetto e tira con entrambe le mani per stringere il nodo scorsoio. Dopo aver fatto il nodo, B dovrebbe avere un anello dal nodo, mentre A dovrebbe essere dritto.
Per confermare un'adeguata occlusione del bronco, occludere manualmente il tubo di deflusso dal tubo endotracheale al ventilatore. Ciò non comporterà l'inflazione del polmone sinistro. Successivamente, chiudere l'incisione cutanea con uno o due semplici punti interrotti realizzati con una sutura di nylon 6-0.
Dopo il periodo di ischemia richiesto, tirare delicatamente l'estremità B della cravatta per rilasciare il nodo scorsoio. Avviare immediatamente il muscolo di riperfusione e occludere il tubo di deflusso del tubo endotracheale al ventilatore per rigonfiare il polmone. Durante la riperfusione, chiudere lo spazio della quarta costola con una sutura in nylon 6-0 a punto singolo.
Posizionare il mouse in posizione supina da 15 a 20 minuti prima della fine del tempo di riperfusione. Fissare tutti e quattro gli arti con del nastro adesivo. Dopo aver eseguito una laparotomia della linea mediana, estendere la laparotomia a sinistra e a destra fino alla linea ascellare seguendo la curva della costola più inferiore.
Dall'addome, praticare un'incisione sul diaframma anteriore per entrare nel torace. Quindi estendere l'incisione a sinistra e a destra della linea ascellare anteriore, lungo la costola più inferiore. Dividere le costole bilaterali lungo la linea ascellare anteriore.
Estendere verso l'alto per creare una toracotomia a conchiglia. Ora rifletti la parete toracica anteriore verso l'alto per esporre il cuore e i polmoni bilaterali. Quindi applicare un morsetto alla parete toracica anteriore per facilitare la retrazione.
Utilizzare un morsetto antizanzare curvo nella linea mediana per ritrarre il diaframma verso il basso per una migliore visualizzazione del torace. Quindi, riporta il lobo accessorio che si estende oltre la linea mediana nel torace sinistro e di nuovo nel torace destro. Con l'aiuto di un applicatore con punta di cotone e forbici, dividere il sottile legamento che collega il lobo al torace sinistro, riflettere l'intero polmone anteriormente.
Quindi posizionare un'altra cravatta di seta 6-0 posteriormente all'ilo destro. Fai un nodo scorsoio attorno all'ilo destro assicurandoti che tutti e quattro i lobi del polmone destro siano circondati. Quindi, rivestire un ago da mezzo pollice calibro 31 su una siringa di tubercolina da 1 cc con 200 microlitri di eparina.
Dopo quattro minuti di clamping ilare destro, aspirare il sangue arterioso dal ventricolo sinistro nella siringa. Inclinare l'ago verso il collo sinistro. Possono essere necessarie più punture per ottenere sangue sufficiente per la valutazione ABG.
Il clampaggio ilare sinistro ha comportato una riduzione significativa della pressione parziale di ossigeno nel polmone sinistro rispetto alla toracotomia fittizia. La valutazione ABG ha mostrato che la maggior parte dei neutrofili erano intravascolari dopo il clampaggio ilare del polmone sinistro.
