Drosofila Dissezione cerebrale per analizzare la potatura sinaptica dipendente dall'esperienza del recettore Or42a

Per iniziare, prendi le mosche della drosophila esposte all'olio minerale e all'EB per 24 ore. Etichettare le fiale come un controllo del veicolo o EB esposto e mantenere queste designazioni durante la dissezione e l'elaborazione del cervello. Usando una pinza, trasferisci una singola mosca anestetizzata in un piattino di PBS appena fatto.

Immergere completamente la mosca nel PBS per la dissezione completa del cervello. Quindi, posiziona una mosca con il lato ventrale rivolto verso l'alto. Prendi due pinze affilate fini per afferrare la parte superiore del torace con una pinza e la testa, sotto la proboscide con l'altra.

Tirare la testa e il resto del corpo in direzioni opposte per rimuovere la testa. Assicurarsi che la testa si stacchi facilmente dal torace e lasci la testa isolata per la dissezione. Far scorrere la pinza, precedentemente utilizzata per afferrare il torace, sotto il lato opposto della proboscide.

Tirare delicatamente la cuticola dell'esoscheletro in direzioni opposte per strappare tra gli occhi e rivelare il cervello. Continua a rimuovere la cuticola dell'esoscheletro dalla testa, assicurandoti che tutte le parti siano state rimosse. A questo punto, sciacquare il puntale di una pipetta P20 con PBS e Triton X-100 allo 0,2%.

Trasferire i cervelli nella soluzione di fissaggio nel tubo del tappo subito dopo la dissezione.