Per iniziare, scongelare le fiale di stock di vettori virali su ghiaccio per 20 minuti e diluire le particelle AAV in 100 microlitri di DPBS. Caricare la soluzione AAV diluita in una siringa da un millilitro con un ago da 28 a 30 gauge, evitando bolle d'aria. Fissare il mouse anestetizzato in un sistema di ritenuta dell'illuminatore di coda.
E usa una garza per pulire il sito di iniezione con un antisettico. Massaggiare la coda con due dita fino a quando non si osserva la vena. Quindi iniettare il vettore nella vena caudale con un angolo basso e ritirare l'ago.
Usando un dito, applicare immediatamente una pressione sul sito iniettato per fermare l'emorragia. Per preparare il polossamero 407, scioglierlo in DPBS su un rotatore durante la notte a quattro gradi Celsius in una cabina di biosicurezza. Quindi, trattiene manualmente il mouse sotto una cappa aspirante, posizionando la testa e il corpo verso il basso.
Con un antisettico, pulire il sito di iniezione nel quadrante inferiore sinistro dell'addome lateralmente alla linea mediana. Per iniettare P407, inserire l'ago nella cavità peritoneale con un angolo di 45 gradi o meno. Dopo quattro settimane di induzione dell'iperlipidemia, l'ecocardiografia ha rivelato insufficienza cardiaca con frazione di eiezione conservata, poiché il tempo di rilassamento intraventricolare era prolungato.
È stato osservato un aumento del rapporto tra la velocità del flusso magro della mitralica precoce e la velocità diastolica precoce anulare della mitrala, insieme a una diminuzione della velocità del flusso transmitralico diastolico precoce e tardivo.