Dopo almeno tre o quattro giorni dall'intervento chirurgico della camera finestra, fissare il topo anestetizzato in una fase di imaging con un attacco per anestesia gassosa. Utilizzando la microscopia a campo chiaro, è possibile ottenere un'immagine con un ampio campo visivo, garantendo la visibilità dei divot del marcatore fiduciale sul telaio anteriore del DSFC. Lo stesso giorno, utilizzare la modalità di microscopia intravitale per acquisire un'immagine microvascolare.
Dopo aver posizionato il topo sul lettino per la risonanza magnetica, inserire un ago a farfalla calibro 27 con microtubo attaccato nella vena caudale. Fissare la camera della finestra in un dispositivo di immobilizzazione stampato in 3D Utilizzando un ago calibro 18, iniettare il lubrificante veterinario per gli occhi nei sette tubi del fiducial marker MRI. Applicare il fiducial marker al DSFC.
Inserire il letto in uno scanner MRI preclinico da sette Tesla. Per l'acquisizione, impostare un campo visivo di 32 x 32 millimetri con una matrice di 64 x 64 per 0,5 x 0,5 millimetri in risoluzione semplice con impulsi RF coerenti. Acquisisci set di immagini pesate in T2 coronale e assiale per visualizzare il piano della camera della finestra.
Prescrivere e riorientare iterativamente un set sagittale pesato in T2 per allineare le sezioni di imaging con il DSFC e i marcatori fiduciali, assicurandosi che la sezione cinque contenga il segnale tissutale nel DSFC e la sezione quattro no. Eseguire l'imaging microvascolare utilizzando il metodo di risonanza magnetica con mezzo di contrasto dinamico selezionato. Nell'area di lavoro MATLAB, caricare i dati microvascolari, di microscopia a campo chiaro e di risonanza magnetica microvascolare, quindi fare clic sul pulsante Esegui.
Passare al file contenente le sezioni di risonanza magnetica pesate in T2 e selezionare fino a quattro sezioni che visualizzano i marcatori fiduciali. Posizionare un punto su ciascuno dei sette marcatori fiduciali nell'immagine MRI e abbinarli al punto corrispondente sull'immagine al microscopio. Selezionare almeno tre punti di riferimento microvascolari sull'immagine microvascolare svOCT e i punti corrispondenti nell'immagine microscopica.
Contornare il tumore nell'immagine di microscopia coregistrata, quindi vengono visualizzati il set di dati microvascolari svOCT, l'immagine di microscopia coregistrata e le mappe dei parametri MRI coregistrate. Salvare la mappa per un'analisi successiva. La coregistrazione dell'imaging microvascolare, della microscopia a campo largo e della risonanza magnetica in topi sani e portatori di tumore consente l'analisi della correlazione delle metriche microvascolari e macrovascolari.
Le metriche macrovascolari MRI dinamiche con mezzo di contrasto hanno mostrato forti correlazioni tra le metriche microvascolari derivate da svOCT, come indicato dai valori R al quadrato in entrambi i grafici. Le correlazioni sono state misurate sia in topi sani che portatori di tumore per valutare la capacità della risonanza magnetica con mezzo di contrasto dinamico di misurare le caratteristiche vascolari in architetture microvascolari molto diverse.
