Per iniziare, posizionare l'ambystoma Mexicanum sedato con il lato ventrale rivolto verso il basso su tovaglioli di carta bagnati imbevuti di soluzione di benzocaina allo 0,03%. Copri l'animale con tovaglioli di carta imbevuti di benzocaina. Usa un paio di pinze ad anello per allungare l'arto posteriore operativo.
Con un bisturi, praticare un'incisione longitudinale laterale sopra l'osso del femore che copre l'intera coscia nell'arto posteriore superiore. Spostare con cautela i muscoli e i nervi dal sito dell'intervento chirurgico senza tagliare. Metti delicatamente la pinza Bode sotto il femore per esporlo per l'intervento chirurgico.
Ora posiziona una piastra fissatrice rigida a quattro fori da 7,75 millimetri lungo la diafisi del femore senza toccare le articolazioni e fissala in posizione allineata con una pinza. Utilizzare quattro viti in titanio da due millimetri per fissare l'osso alla placca. In irrigazione, con 0,7 volte PBS e 1% di penicillina streptomicina, forare manualmente per creare il primo foro nell'osso per l'inserimento della vite.
Quindi posizionare la prima vite nel foro. Applicare il dispositivo di guida della sega sulla prima vite e allinearlo con l'osso e la placca. Utilizzare il dispositivo di guida della sega per forare e inserire le viti rimanenti.
Dopo aver assicurato l'allineamento della piastra con l'osso, rimuovere la guida della sega e utilizzare un cacciavite per rompere le impugnature dalle viti. Posizionare un pezzo di pellicola di plastica sterilizzata sotto il femore per evitare danni ai tessuti molli durante il processo di osteotomia. Quindi posizionare una sega a filo Gigli tra l'osso e la pellicola di protezione.
Tagliare l'osso utilizzando una sega a filo Gigli creando un unico taglio di 0,7 millimetri nel femore. Rimuovere la sega e la pellicola protettiva e irrigare il sito dell'intervento chirurgico con 0,7 volte PBS e 1% di penicillina streptomicina. Coprire la parte superiore della placca e le viti con cera ossea sterile per proteggere la pelle e i muscoli dall'irritazione dei bordi delle viti.
Posiziona i muscoli e la pelle sopra la cera. Chiudere il sito di incisione con una sutura sintetica di taglia 7.0 utilizzando semplici punti interrotti. Dopo l'intervento chirurgico, per risvegliarsi, mettere l'animale in una vasca d'acqua artificiale fresca integrata con penicillina, streptomicina e butorfanolo.
La micro TC e l'analisi istologica hanno facilitato la visualizzazione dell'osso, delle posizioni dei frammenti e delle dimensioni delle fessure e dello stato di guarigione. In particolare, l'ambystoma Mexicanum non ha mostrato alcuna formazione di callo tre settimane dopo l'intervento chirurgico, a differenza dei mammiferi. Un callo cartilagineo era visibile a tre mesi e un callo osseo ossificato è apparso a sei mesi dopo l'intervento.
