Per iniziare, posizionare le fiale di buprenorfina diluite in soluzione salina sterile allo 0,9% e di notexina, diluita in PBS, su ghiaccio. Sotto la configurazione del cono del naso, radere gli arti posteriori di un topo anestetizzato con un rifinitore, quindi trasferire nuovamente il mouse nella scatola di induzione. Preparare siringhe da insulina con 15 microlitri di soluzione di notexina per GA e 10 microlitri di soluzione di notexin per iniezioni di TA.
Una volta che il topo è stato spostato sul cono anteriore, disinfettare il sito di iniezione con una salvietta a base di etanolo. Inserire l'ago con lo smusso rivolto verso il basso nella pancia del muscolo TA con un angolo di 30 gradi. Far avanzare l'ago parallelamente alla tibia per raggiungere la metà del ventre del TA e iniettare lentamente la soluzione di notexin per 10 secondi.
Per iniettare la soluzione di notexin nell'AG, inserire l'ago con un angolo di 45 gradi nella parte centrale della pancia della testa laterale del muscolo GA e iniettare la soluzione. Girare il mouse e, utilizzando una siringa da insulina, iniettare buprenorfina per via sottocutanea. Calcolare il volume della soluzione di iododesossiuridina necessaria per ciascun topo utilizzando questa equazione.
Utilizzando una siringa da insulina, eseguire un'iniezione intraperitoneale di soluzione di iododesossiuridina nel sito di iniezione sterilizzato da 8 a 12 ore prima dell'eutanasia.
