Trattamento del callo di carota con pesticidi triazolici per valutare la citotossicità dei metaboliti dei pesticidi

Inizia trattando il callo di carota raccolto con i diversi pesticidi triazolici in condizioni sterili. Per fare ciò, in fiasche di vetro separate, mescolare tre grammi di callo di carota con 10 millilitri di ciascuna soluzione di pesticida preparata in terreno MS. Mescolare anche tre grammi di callo di carota con 10 millilitri di terreno MS asettico in un altro pallone di vetro.

Incubare i campioni di callo di carota preparati a 130 giri/min e 26 gradi Celsius al buio per 72 ore. Impostare tutti i trattamenti in triplice copia. Dopo l'incubazione, utilizzando filtri in fibra di vetro da 0,5 micron, raccogliere il callo di carota dal terreno mediante filtrazione.

Lavare il callo con acqua ultrapura tre volte. Infine, liofilizzare il callo utilizzando un liofilizzatore a 55 gradi Celsius, quindi omogeneizzarlo utilizzando un macinatore di tessuti ad alta produttività a 70 hertz per tre minuti. Le concentrazioni di tutti i pesticidi sono diminuite esponenzialmente nei terreni di coltura.

Mentre quelli nei calli di carota hanno iniziato ad aumentare, raggiungendo un picco a quattro o otto ore, seguito da una graduale diminuzione. Questi risultati hanno suggerito che i pesticidi sono stati rapidamente assorbiti e trasformati dal callo di carota. I recuperi temporali dei pesticidi nel sistema di coltura callosa hanno mostrato che solo l'8,3-11% dei pesticidi rimaneva dopo un'incubazione di 72 ore, indicando che la maggior parte dei pesticidi era stata trasformata in metaboliti.