Estrazione chimica del callo di carota trattato con pesticidi per valutare la citotossicità dei metaboliti dei pesticidi

Per iniziare, mescola 0,2 grammi di polvere macinata di ciascun campione di carota callosa liofilizzata e trattata con pesticidi, con tre millilitri di acetonitrile in una provetta da centrifuga da 10 millilitri. Agitare il tubo da centrifuga per otto minuti, quindi sonicarlo per cinque minuti a 150 watt e 40 kilohertz. Quindi, centrifugare la provetta a 8.000 g e quattro gradi Celsius per 10 minuti, prima di raccogliere il surnatante mediante pipettaggio.

Utilizzando un concentratore a soffiaggio di azoto a 40 gradi Celsius, concentrare gli estratti raggruppati fino a quando non saranno asciutti. Risciogliere i residui dell'estratto in un millilitro di DMEM, contenente lo 0,3% di DMSO per ottenere la soluzione di esposizione al metabolita del pesticida. In modo analogo, risciogliere i residui dell'estratto ottenuto dai campioni callosi bianchi.

in un millilitro di DMEM, contenente lo 0,3% di DMSO. Quindi, sciogliere un milligrammo di ciascun pesticida utilizzato in diverse provette contenenti la soluzione di residuo del campione bianco per produrre soluzioni di esposizione ai pesticidi apparenti.