Per iniziare, pesa cinque grammi di polimero super assorbente secco o SAP e mescolalo con 500 millilitri di soluzione nutritiva MMS1. Circa una settimana prima dell'assemblaggio, germinare i semi di plantago lanceolata su carta assorbente inumidita con soluzione nutritiva MMS1 in una capsula di Petri. Quindi incubare la capsula di Petri al buio a temperatura ambiente.
Per iniziare ad assemblare il sistema SAP-AS, posizionare il gambo della piantina nella tacca sul lato della capsula di Petri con la radice verso l'interno e i cotiledoni o le foglie e gli steli verso l'esterno. Copri le radici con circa 1,5-2 grammi di vermiculite. Successivamente, idratare il compartimento radicolare con otto millilitri di soluzione nutritiva MMS1.
Libera uno spazio privo di vermiculite lungo il filtro a rete di nylon sul lato del compartimento della radice e aggiungi cinque grammi di SAP idratata. Quindi aggiungere 15 grammi di SAP idratato nello scomparto ad alto riempimento. Ora allinea le tacche laterali del coperchio e il fondo della piastra di Petri per evitare di danneggiare lo stelo e chiudi il coperchio.
Quindi sigillare la capsula di Petri con una striscia di parafilm, unendo la base e il coperchio. Pesare la capsula di Petri e registrare il suo peso medio per determinare quando la SAP-AS ha bisogno di reidratazione. Quindi impila le piastre di Petri per ottimizzare lo spazio.
Usa una copertura opaca con un'apertura sul lato per mantenere le piantine al buio. Usando una candela a fiamma o un bruciatore Bunsen, riscalda la pipetta di vetro e allunga il tubo di vetro mentre si scioglie per separarlo. Sotto uno stereomicroscopio, rompere la punta della pipetta di vetro per ridurne il diametro interno.
Ora apri la capsula di Petri e individua dove deve essere posizionata la spora. Libera uno spazio tra i cinque grammi di linfa idrata lungo la membrana filtrante a rete di nylon per esporre una sezione di una radice. Sotto il microscopio da dissezione, prelevare una spora in una sospensione liquida con la pipetta estrusa, mentre pipettare un po' di liquido prima di raccogliere la spora.
Successivamente, deposita con cura la spora sulla radice. Quindi sostituire la linfa sul frammento di radice per mantenere un microambiente umido per la radice e la spora. Trascorse le 24 ore, se necessario, irrigare il compartimento radicolare, facendo attenzione a non lavare via le spore.
Allineare le tacche laterali del coperchio con il fondo della capsula di Petri per evitare di danneggiare il gambo della piantina e chiudere la capsula di Petri con il coperchio.
